高致病性豬藍耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
高致病性豬藍耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)中含有聚合酶鏈式反應(yīng)所需要各種試劑組分,,如:引物,、dNTPs、緩沖液,、Taq酶等,,PCR反應(yīng)液混合液中加入檢測樣品,即可進行PCR擴增反應(yīng),。PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖電泳染色判斷,,陽性樣本將在相應(yīng)大小的片段處出現(xiàn)特異性條帶。
規(guī)格: 50T/100T
分類:pcr-熒光試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復凍融,。
運輸:低溫、避光,,快遞免費送貨上門,。
高致病性豬藍耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增,;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝,;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測,;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒,。
需要注意什么:
PCR反應(yīng)液請在冰中配制,然后置于PCR反應(yīng)儀上進行PCR反應(yīng),。這種冷啟動法(Cool Start Method)與熱啟動法(Hot Start Method)相結(jié)合,,更能有效地減少PCR過程中的非特異性反應(yīng),,增強PCR擴增的特異性,能得到良好的PCR結(jié)果,。
PCR的反應(yīng)條件:
因擴增片段的大小,、反應(yīng)體積、使用擴增儀器的不同而不同,。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小,,設(shè)定25~30個循環(huán),。
如果循環(huán)次數(shù)太少,,擴增量不足;如果循環(huán)次數(shù)太多,,則會出現(xiàn)Smear,。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外,,由于在60~68℃間,,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時,,每kbp大體可設(shè)定30秒~1分鐘,;當溫度設(shè)定在68℃以下時, 時間設(shè)定可稍長一些。通常,,Anneal溫度太高,,有時會得不到擴增產(chǎn)物;Anneal溫度太低時,,容易發(fā)生非特異性反應(yīng),。另外,Extension時間太短時,,會得不到擴增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成,;而Extension時間太長時,會出現(xiàn)Smear,。