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6克侖特羅、萊克多巴胺和沙丁殘留檢測試紙條
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克侖特羅,、萊克多巴胺和沙丁殘留檢測試紙條
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克侖特羅,、萊克多巴胺和沙丁殘留檢測試紙條
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本試劑采用膠體金免疫層析試驗(GICA)
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蛋白質(zhì)含量檢測方法概述
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提供商
賽諾利康生物技術(shù)（北京）有限公司
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資料大小
54.5KB
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資料類型
WORD 文檔
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蛋白含量檢測試劑盒(BCA法)
產(chǎn)品名稱
通用名：蛋白質(zhì)含量檢測試劑盒(BCA法)
原理
在堿性環(huán)境下蛋白質(zhì)分子中多肽鍵結(jié)構(gòu)與Cu2+絡(luò)合并將Cu2+還原成Cu+,，BCA與Cu+特異性結(jié)合成穩(wěn)定的紫色復(fù)合物,，該復(fù)合物在562nm處有*的光吸收值,，在一定范圍內(nèi),，光吸收值與蛋白質(zhì)濃度成正比，溶液顏色的深淺與蛋白質(zhì)含量成正比,，可根據(jù)光吸收值測定蛋白質(zhì)濃度,。
實驗試劑
試劑A 100ml (4℃保存)
試劑B 30ml (4℃保存)
4mg/ml BSA標(biāo)準(zhǔn)品 0.5ml (-21℃保存)
儀器
酶標(biāo)儀或分光光度計，工作波長540nm~590nm,，*工作波長562nm,如無此波長,，建議優(yōu)先使用490nm波長。
適用范圍
不含還原劑的蛋白樣品,。
實驗步驟
1. 工作液配制：將試劑A與試劑B按50:1的比例混合均勻,。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：用純化水將2mg/ml的BSA標(biāo)準(zhǔn)品依次稀釋為以下濃度1600、800,、400,、200、100,、50,、25ug/ml。注意用純化水標(biāo)記空白,。
3. 參照下表上樣
空白 | 標(biāo)準(zhǔn) | 待測 | |
純化水ul | 20 | ||
標(biāo)準(zhǔn)品ul | 20 | ||
待測品ul | 20 | ||
BCA工作液ul | 200 | 200 | 200 |
充分混勻后,，在37℃條件下孵育30分鐘或室溫下靜置2小時。
4. 在酶標(biāo)儀或分光光度計上,，以562nm波長下,，空白管調(diào)0后測定各管OD值,。
5. 以O(shè)D值為Y軸，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為X軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
6. 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找待測樣品濃度,，注意稀釋后的樣品所測濃度需乘以稀釋倍數(shù)。
說明
1. BCA法的檢測范圍是20-2000ug/ml,，若樣本超過此范圍需再酌情稀釋,。
2. 樣本中含有還原劑，EDTA或葡萄糖濃度大于10mM時不可直接使用BCA法,，樣本經(jīng)液體樣品蛋白抽取試劑沉淀后,，可*去除干擾物質(zhì)。
3. 在37℃孵育30分鐘或室溫下靜置2小時對檢測比較便利,，但嚴(yán)格來講,，此時反應(yīng)尚未達到終點，通常每10分鐘A562下OD值升高約2.3%,，在10分鐘內(nèi)測定不會影響精度,。
4. 可測量吸附于固相支持物如酶標(biāo)版、瓊脂糖,、親和層析凝膠上的蛋白,。
5. 本法僅適用于科研。