關(guān)于布病抗體的檢測(cè)方法,,哪種更合適您,?
布魯氏菌病(簡(jiǎn)稱(chēng)布?。﹪?yán)重危害畜牧養(yǎng)殖業(yè)安全和人類(lèi)健康,,而有效的檢測(cè)方法能夠?yàn)椴疾〉念A(yù)防、檢測(cè)和凈化提供技術(shù)支持,。
布病檢測(cè)方法很多,,包括膠體金試紙條檢測(cè)、酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法,、布病虎紅平板凝集試驗(yàn),、試管凝集試驗(yàn)、全乳環(huán)狀實(shí)驗(yàn)等,,在眾多檢測(cè)方法中,,膠體金試紙條檢測(cè)法最為簡(jiǎn)單方便,其檢測(cè)準(zhǔn)確性如何,?
布病抗體檢測(cè)卡檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性如何,?一起來(lái)關(guān)注——
布魯氏菌病抗體檢測(cè)方法有那些?
01免疫膠體金檢測(cè)技術(shù)(GICA)
免疫膠體金檢測(cè)技術(shù)是基于抗原抗體檢測(cè)的一種新型免疫標(biāo)記技術(shù),,在生物醫(yī)學(xué)的各領(lǐng)域得到了日益廣泛的應(yīng)用,。
膠體金法將布魯氏菌抗原固定在NC濾膜上,當(dāng)待測(cè)樣本存在布魯氏菌病抗體時(shí),,血清抗體將會(huì)有固定在NC膜上的抗原結(jié)合形成復(fù)合物,,在膠體金顆粒的加持下,會(huì)顯色出紅色條帶,,進(jìn)而判定樣本中是否存在抗體,。GICA 具有高靈敏度,、血清用量更少、適于現(xiàn)場(chǎng)操作,、檢測(cè)樣品廣泛(部分GICA 產(chǎn)品檢測(cè)范圍可以涵蓋血清,、全血、奶樣等不同樣品)等優(yōu)勢(shì),。
02酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)
用于布病檢測(cè)的 ELISA 有兩種:
①間接 ELISA(i ELISA)
②競(jìng) 爭(zhēng) ELISA(c ELISA)
i ELISA是待檢血清樣本中的布魯氏菌抗體與 ELISA 板上固定的布魯氏菌抗原物質(zhì)結(jié)合,,利用酶標(biāo)抗體檢測(cè),然后通過(guò)底物顯色,,最后用酶標(biāo)儀來(lái)讀值,。i ELISA 靈敏度較高,標(biāo)記的抗體較少,,成本更低,,但是試驗(yàn)周期更長(zhǎng)。c ELISA 步驟較復(fù)雜,,但可以檢測(cè)含有布魯氏菌抗體的不純凈血清,,數(shù)據(jù)再現(xiàn)性更高,,但是整體敏感性和特異性稍低,。
ELISA 檢測(cè)布病的敏感性較高,用酶標(biāo)儀判定試驗(yàn)結(jié)果,,避免了肉眼觀察判定結(jié)果的誤差,,但對(duì)專(zhuān)業(yè)儀器要求較高,檢測(cè)試劑比較昂貴,,增加了檢測(cè)成本,此外檢測(cè)過(guò)程中對(duì)環(huán)境溫度的要求也較高,,因而限制了ELISA 的使用,。
虎紅平板凝集試驗(yàn)是一種經(jīng)典的血清凝集試驗(yàn),靈敏度高,、價(jià)格便宜,、操作方便。但受試驗(yàn)溫度和凝集時(shí)間相對(duì)較短的影響,,不易準(zhǔn)確判定 結(jié)果,,而且受操作人員的主觀判斷影響比較大,故常作為篩選試驗(yàn),,適用于具有專(zhuān)業(yè)知識(shí)背景的試驗(yàn)人員用于高危動(dòng)物篩查及流行病學(xué)的研究,。
04試管凝集試驗(yàn)(SAT)
試管凝集試驗(yàn)是一種檢測(cè)血清中布魯氏菌抗體的方法。布魯氏菌抗原能夠與血清中的IgM抗體反應(yīng)產(chǎn)生凝集現(xiàn)象,,通過(guò)肉眼觀察試管中的凝集現(xiàn)象可做出結(jié)果判定,。試管凝集試驗(yàn)特異性較強(qiáng),,不易受其他干擾因子影響,陽(yáng)性結(jié)果比較準(zhǔn)確,。
但試管凝集試驗(yàn)也存在一定的不足,,如每個(gè)血清樣本需要4支試管來(lái)實(shí)現(xiàn)4個(gè)梯度的試驗(yàn),在進(jìn)行大批量樣本檢測(cè)時(shí),,需要大量的試管,,試驗(yàn)過(guò)程中還需要24h的孵育時(shí)間,不僅對(duì)耗材的需求量較大,,且試驗(yàn)時(shí)間也較長(zhǎng),。
05全乳環(huán)狀試驗(yàn)(MRT)
全乳環(huán)狀試驗(yàn)主要通過(guò)檢測(cè)牛奶樣本中的抗體來(lái)實(shí)現(xiàn)布病檢測(cè),且一般僅用于奶牛的布病檢測(cè),,不適用于其他品種家畜,。如果待檢牛奶樣本中存在布魯氏菌抗體,就會(huì)與試驗(yàn)用的紅色布魯氏菌抗原形成復(fù)合物,,這些復(fù)合物會(huì)形成紫紅色的乳脂環(huán),,從而實(shí)現(xiàn)布病檢測(cè)。相比較于其他需要血清的檢測(cè)方法,;
全乳環(huán)狀試驗(yàn)具有一定的優(yōu)勢(shì),,無(wú)論是單一奶牛的牛奶還是混合的大缸奶,都能實(shí)現(xiàn)布病檢測(cè),,無(wú)需采血,,不會(huì)使奶牛因驅(qū)趕、保定,、采血等行為產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng),,使奶牛產(chǎn)量不受影響,養(yǎng)殖戶更容易接受,。
全乳環(huán)狀試驗(yàn)的敏感性能夠滿足大型牛場(chǎng)布病的現(xiàn)場(chǎng)篩查,,特異性較強(qiáng),操作快捷而簡(jiǎn)便,,試劑成本不高,,試驗(yàn)結(jié)果可靠準(zhǔn)確,全乳環(huán)狀試驗(yàn)是一種能夠代替試管凝集試驗(yàn)(SAT)的布病檢測(cè)方法,。但是,,如果牛奶樣本存放時(shí)間較長(zhǎng),或試驗(yàn)溫度較高導(dǎo)致牛奶樣本腐敗,,檢測(cè)結(jié)果就可能出現(xiàn)假陽(yáng)性,。當(dāng)牛奶樣本中存在的初乳較多或者混合樣本量較大時(shí),也有可能出現(xiàn)一定的假陽(yáng)性結(jié)果,。
布魯氏菌病作為人畜共患病,,檢測(cè)的方法包括抗原檢測(cè)法和血清/全血抗體檢測(cè)法兩大類(lèi)型,。其中病原檢測(cè)需要在專(zhuān)業(yè)的P3實(shí)驗(yàn)室或者專(zhuān)業(yè)的儀器配備相應(yīng)人才檢測(cè)等條件限制了此種檢測(cè)方法的應(yīng)用范圍,才導(dǎo)致了布魯氏菌病血清檢測(cè)法成為布魯氏菌病診斷的采用方法,。
布病血清/全血抗體檢測(cè)的方法很多,,膠體金法由于其操作便捷性和較高性價(jià)比,勢(shì)必逐步取代傳統(tǒng)虎紅平板法被用作現(xiàn)場(chǎng)布魯氏菌病的快速篩查的檢測(cè)產(chǎn)品,。