熒光定量PCR的效率值可通過標(biāo)準(zhǔn)曲線獲取,。理想的反應(yīng)效率為100%,。效率較高(高于110%)一般說明反應(yīng)過程中存在抑制作用。引起抑制作用的原因主要是RAN或者DNA質(zhì)量較差,,模板濃度過高及含有核酸鈍化的殘余物,。反應(yīng)效率較低(低于90%)的原因有試劑濃度不適(主要是引物、鎂,、Taq ,、 DNA、聚合酶,、尤其是在多重試驗(yàn)中),。造成效率低的其他因素有引物 T m之間的差異超過5℃或者是熱循環(huán)條件不適。抑制作用和較低的效率會影響分析的靈敏度,,導(dǎo)致動態(tài)范圍減小及通用性降低,。怎樣解決呢?可在做凍干時降低模板濃度,,優(yōu)化工藝曲線等,。試劑凍干機(jī)Pilot7-12T提供對藥品,、診斷試劑、蛋白,、多肽,、酶、抗體,、抗原等進(jìn)行凍干工藝優(yōu)化,,包括保護(hù)劑篩選、凍干曲線優(yōu)化,、凍干穩(wěn)定性測試,、凍干生產(chǎn)工藝設(shè)計(jì)等。
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