BNCC菌種測(cè)序名錄-中昌國(guó)研標(biāo)物

細(xì)胞分選技術(shù)有新突破啦,！

細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù),，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來(lái)說(shuō),，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)*的過(guò)程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)模克隆,。但在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中也難免遇到這樣那樣的問(wèn)題,，就比如常見(jiàn)的細(xì)胞密度不均勻問(wèn)題就很令人頭疼，那又該怎么辦呢,？

下面便是小編為大家整理的幾點(diǎn)關(guān)于細(xì)胞分布不均的實(shí)用經(jīng)驗(yàn)：

1,、盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞,，DPBS清洗一遍,，加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶,，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠,，延長(zhǎng)消化時(shí)間,。

2、96孔板一般以100 微升每孔接種,，直接用100 微升移液器吸取細(xì)胞懸液,，沿孔壁（稍離開(kāi)一點(diǎn)孔底即可，不要離底太高）直接接入,，移液器不需*打到大,，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液,。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊,，右手輕輕敲擊板的右邊緣,，注意把握力度（一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不好），依次敲擊剩余三個(gè)邊,，靜置約5分鐘,，放入37度培養(yǎng)箱。

3,、6孔板,、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養(yǎng)基,，晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底,，然后用移液槍吸至第二孔,，同樣方法浸潤(rùn)孔底，其它孔依此類推,，這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的,，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底,，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下,。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢,。也可以采用輕拍的方式,，但力度沒(méi)有96孔板好掌握，效果沒(méi)有96孔板好,。

4,、培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次,，馬上逆時(shí)針搖晃3次,。然后延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次,。