實驗室質譜分析操作使用                                 

      標簽: 質譜 方法 誤差 檢測器

      質譜具有很高的靈敏度和分辨率，在定性和定量方面具有較大優(yōu)勢,，所以，目前配置質譜的實驗室越來越多,，質譜相對于色譜來說,，除了對環(huán)境的要求*，操作和維護同樣更加頻繁,。

      質譜儀種類非常多,，工作原理和應用范圍也有很大的不同，從應用角度,，質譜儀可以分為下面幾類：

      1.有機質譜儀

     由于應用特點不同又分為：

     ①氣相色譜-質譜聯(lián)用儀(GC-MS)

     在這類儀器中,，由于質譜儀工作原理不同，又有氣相色譜-四極質譜儀,，氣相色譜-飛行時間質譜儀,，氣相色譜-離子阱質譜儀等。

     ②液相色譜-質譜聯(lián)用儀(LC-MS)

     同樣,，有液相色譜-四器極質譜儀,，液相色譜-離子阱質譜儀，液相色譜-飛行時間質譜儀以及各種各樣的液相色譜-質譜-質譜聯(lián)用儀,。

     ③其他有機質譜儀

     主要有：基質輔助激光解吸飛行時間質譜(MALDI-TOFMS),，傅立葉變換質譜儀(FT-MS)

     2.無機質譜儀

     包括：火花源雙聚焦質譜儀。

     感應耦合等離子體質譜儀(ICP-MS),。

     二次離子質譜儀(SI-MS)

     除上述分類外,，還可以從質譜儀所用的質量分析器的不同，把質譜儀分為雙聚焦質譜儀,、四極桿質譜儀,、飛行時間質譜儀、離子阱質譜儀,、傅立葉變換質譜儀等,。

     質譜儀維護小妙

     質譜儀周圍環(huán)境要求：

     ①周圍無強烈震蕩源及電磁感應裝置;

     ②電源要求為接地交流電;

     ③室溫要求：15-28℃;

     ④相對濕度要求：20%～80%;

     可見，使用過程中要特別注意室內溫度和濕度的控制,。一般沒有外置飛行管的飛行時間質譜對環(huán)境的要求更嚴格,，外部環(huán)境會直接影響質量軸的準確性。質譜儀采用兩級抽氣結構,，前級為機械泵,，后級為分子渦輪泵。工作時,，先由前級泵,，將真空腔內的壓強降低幾個數(shù)量級，再由后級泵降至工作所需壓強,。

     一. 開機：

     質譜儀的開機首先開氣,，再開機械泵，再打開質譜儀的電源,，等真空度達到后再開啟分子渦輪泵,，等真空度達到后才可以進行協(xié)調校正，一般至少需要抽12個小時才能達到,。每次開機后都需要校正后才能使用質譜儀,。

     二. 樣品測試過程：

     與液相色譜聯(lián)用時，流動相需要先用膜過濾,，需要區(qū)別有機膜和水膜,，樣品也同樣需要過濾或者用>10000rpm的轉速離心去掉固體雜質。

     流動相不能用難揮發(fā)的酸或鹽,，如,，磷酸鹽和硼酸鹽，液相常用的TFA會抑制離子電離，也不建議使用;表面活性劑在質譜中響應很高,，尤其是ESI源,，所以，所有管和器具的清洗不能用洗潔精,，用來改善分離和色譜峰形的離子對試劑也應慎用,，與質譜聯(lián)用時建議使用的是甲酸、乙酸,、甲酸銨,、乙酸銨和氨水等。

     根據(jù)選用的離子源調整液相方法,，ESI源一般用0.3-0.6mL/min,，常規(guī)HPLC分析柱的規(guī)格是5μm，4.6×250mm的,，一般流速都是1mL/min,，可以采用柱后分流的方式來調整進入質譜的流量。同時,，要根據(jù)進入質譜的流量和樣品性質調整霧化氣溫度和霧化氣的流量,。

     樣品測試結束后，需要清洗進樣管路,，清洗后停泵,，待離子源溫度降低后再選擇待機狀態(tài)。

     三.日常定期維護：

     前期,，機械泵隨著樣品的檢測會有有機溶劑進入泵中,，需要定期打開震氣閥震氣20min左右，震氣時間不能太長,，太長會導致泵油消耗過快,。根據(jù)檢測量來調整震氣的頻率，一般建議一周一次,。

     離子源腔體和取樣錐孔,、擋蓋用無塵紙和50%甲醇水清洗，一般一周一次,。

     機械泵的泵油需要定期更換,，一般半年更換一次，如果泵油看起來很臟,，需要提前更換,。更換泵油時需要將泵油全部倒出，再更換新的泵油,，不同品牌的泵油不能混用,。一般實驗室的質譜儀都會在長假的時候進行大的維護,。

     一般日常維護除了更換泵油之外，都是不需要在卸真空的狀態(tài)下進行,，質譜內部的清理和維護一般比較少做到,，建議交給維修工程師來做，內部金屬件可以用氧化鋁粉來打磨,，其他組件注意不要碰到有機試劑，尤其是密封圈之類的,。

     四.關機：

     關機需要先vent,，放空系統(tǒng)，再關閉機械泵,。

     質譜操作說明及注意事項

     質譜操作說明及日常使用注意事項：

     1.開機

     1)打開主電源,，打開旁路泵電源，打開毛細管加熱裝置(CPS),。

     2)觀察壓力顯示面板,，用▲▼箭頭調節(jié)黑條顯示位置，使其調到Turbo Back 選項,，按兩次進入鍵(〇),，開啟渦輪分子泵和背景泵;按返回鍵(〓)回到主面板。觀察Turbo進度,，使其達到正常運轉(黑條到頭),。按▼箭頭調節(jié)至AIMX選項，觀察壓力顯示,，使其在1*10-6以下,。*工作壓力為5*10-6以下。

     3)壓力達到要求后,，打開控制箱(RC Interface),，聽見滴的一聲，打開MA soft的軟件開始實驗設置,。

     2.軟件操作

     1)新建文件：File-New File新建文件,，出現(xiàn)主窗口;

     2)查看Global：RGA和Shutdown中的參數(shù)，確認燈絲狀態(tài),，在Global：RGA燈絲點著一根,，而在Shutdown中燈絲是全部熄滅的，選擇OK;

     3)雙擊Scan mass,，選擇實驗模式,，里面有Bar，Profile 和MID 三種模式,，做全譜掃描時用Bar或Profile,，一般用Profile可調節(jié)掃描速率和精度,，比較。針對特定質量數(shù)的掃描用MID模式,。當采用Profile模式時,，可選擇掃描范圍。當需要分段掃描時,，先選定Scan mass點擊一下,，再點擊工具欄上選項，可添加通道,。

     4)針對不同掃描范圍選擇不同檢測器時,，可雙擊檢測器單元，出現(xiàn)一對話框,，根據(jù)氣體壓力范圍選擇不同的監(jiān)測器,，F(xiàn)araday檢測器的壓力范圍是：1*10-5-10-10，SEM檢測器的壓力范圍是：1*10-7-10-14,。

     5)選中Scan mass,，按住Ctrl 可多選，點擊New Graph View,， 出現(xiàn)掃描窗口,。

     6)點亮燈絲，觀察控制箱上燈絲狀態(tài),，當燈絲亮啟后,，點擊綠色開始按鈕，開始掃描,。

     注意：兩個燈絲不能同時打開,，勿點擊Degas analysis Source, 容易燒壞燈絲，點擊該按鈕前,，請與該公司工程師聯(lián)系,。

     7)當需要查看各個循環(huán)次數(shù)時，可選擇要查看的Scan窗口,，點擊右鍵,，選擇Mode-Historical data，當需要轉化到目前的掃描窗口時,，選擇Real time,。

     8)當掃描結束時，點擊黃燈結束當前循環(huán)后停止,，紅燈則馬上停止掃描,。

     9)可選擇路徑自己保存數(shù)據(jù)File-Save As , 可導出Excel 數(shù)據(jù)File-Export-File

     10)格式可選擇曲線顏色：Views—Trend View setup ; 在Windows中可改變窗口形式。

     11)在Edit-Library-compound中可查看各物質的峰含量圖譜,，可點擊New進行添加新物質,。

     12)雙擊Repeated,，出現(xiàn)一對話框(Scan structure Cycles)，“Shutdown after Scanning”表示燈絲的狀態(tài),，在該框前打√,，則表示做完一個實驗燈絲則自動關掉;不打√，則表示做下個實驗時不需要開燈絲,。

     3.關機

     1)關閉MAS soft 軟件,，然后關閉控制箱。

     2)關泵,，使用▲▼箭頭調節(jié)黑條顯示位置,，使其調到Turbo Back 選項，按兩次進入鍵(〇),，關掉渦輪分子泵和背景泵;按返回鍵(〓)回到主面板。觀察Turbo進度,，當聽到渦輪分子泵放氣的聲音,，觀察黑條進度，確認分子泵*關閉(黑條沒有),。再關掉CPS,，關閉旁路泵，關閉主電源,。

     4.注意事項：

     1)實驗過程中,，切勿用肥皂泡檢查氣路，包括自己的氣路在檢查時也一定要與質譜接口斷開(非常重要,，很多質譜都因為學生采用肥皂泡檢漏使得四級桿污染無法繼續(xù)使用);

     2)一般情況下,，質譜要保持正常運行狀態(tài)，除非15天以上不用儀器,，方可關閉,。因為質譜需要一定時間穩(wěn)定(24h以上)，頻繁開關質譜也會加速真空規(guī)污染,。在預知停電的情況下,，請?zhí)崆瓣P掉質譜。

     3)泵油的更換：要經(jīng)常觀察泵油顏色,，當變成黃褐色時應立即更換,。如果儀器使用頻繁且氣體比較臟，則要求至少半年更換一次,，加入泵油量不超過上層液面,。

     4)QIC20散熱過濾網(wǎng)應定期進行清洗(每兩個月清洗一次)，在夏天沒有空調的房間使用時盡量打開上蓋,，以防影響儀器散熱,。

     5)毛細管在不與外部儀器連接時,，不要直接放置在臟的桌面上，盡量懸空放置;毛細管內部的過濾器要定期清洗,，在拆裝過程中注意不要丟失部件,。

     6)在儀器運輸過程中，如果有油泵需要放出泵油(若干凈可進行收集以后繼續(xù)使用),、卸掉RF射頻頭,，單獨運輸。