實驗室質(zhì)譜分析操作使用                                 

      標(biāo)簽: 質(zhì)譜 方法 誤差 檢測器

      質(zhì)譜具有很高的靈敏度和分辨率,，在定性和定量方面具有較大優(yōu)勢,，所以，目前配置質(zhì)譜的實驗室越來越多,，質(zhì)譜相對于色譜來說,，除了對環(huán)境的要求*，操作和維護同樣更加頻繁,。

      質(zhì)譜儀種類非常多,，工作原理和應(yīng)用范圍也有很大的不同，從應(yīng)用角度,，質(zhì)譜儀可以分為下面幾類：

      1.有機質(zhì)譜儀

     由于應(yīng)用特點不同又分為：

     ①氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)

     在這類儀器中,，由于質(zhì)譜儀工作原理不同，又有氣相色譜-四極質(zhì)譜儀，氣相色譜-飛行時間質(zhì)譜儀,，氣相色譜-離子阱質(zhì)譜儀等,。

     ②液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS)

     同樣，有液相色譜-四器極質(zhì)譜儀,，液相色譜-離子阱質(zhì)譜儀,，液相色譜-飛行時間質(zhì)譜儀以及各種各樣的液相色譜-質(zhì)譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。

     ③其他有機質(zhì)譜儀

     主要有：基質(zhì)輔助激光解吸飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOFMS),，傅立葉變換質(zhì)譜儀(FT-MS)

     2.無機質(zhì)譜儀

     包括：火花源雙聚焦質(zhì)譜儀,。

     感應(yīng)耦合等離子體質(zhì)譜儀(ICP-MS)。

     二次離子質(zhì)譜儀(SI-MS)

     除上述分類外,，還可以從質(zhì)譜儀所用的質(zhì)量分析器的不同,，把質(zhì)譜儀分為雙聚焦質(zhì)譜儀、四極桿質(zhì)譜儀,、飛行時間質(zhì)譜儀,、離子阱質(zhì)譜儀、傅立葉變換質(zhì)譜儀等,。

     質(zhì)譜儀維護小妙

     質(zhì)譜儀周圍環(huán)境要求：

     ①周圍無強烈震蕩源及電磁感應(yīng)裝置;

     ②電源要求為接地交流電;

     ③室溫要求：15-28℃;

     ④相對濕度要求：20%～80%;

     可見,，使用過程中要特別注意室內(nèi)溫度和濕度的控制。一般沒有外置飛行管的飛行時間質(zhì)譜對環(huán)境的要求更嚴(yán)格,，外部環(huán)境會直接影響質(zhì)量軸的準(zhǔn)確性。質(zhì)譜儀采用兩級抽氣結(jié)構(gòu),，前級為機械泵,，后級為分子渦輪泵。工作時,，先由前級泵,，將真空腔內(nèi)的壓強降低幾個數(shù)量級，再由后級泵降至工作所需壓強,。

     一. 開機：

     質(zhì)譜儀的開機首先開氣,，再開機械泵，再打開質(zhì)譜儀的電源,，等真空度達到后再開啟分子渦輪泵,，等真空度達到后才可以進行協(xié)調(diào)校正，一般至少需要抽12個小時才能達到,。每次開機后都需要校正后才能使用質(zhì)譜儀,。

     二. 樣品測試過程：

     與液相色譜聯(lián)用時，流動相需要先用膜過濾,，需要區(qū)別有機膜和水膜,，樣品也同樣需要過濾或者用>10000rpm的轉(zhuǎn)速離心去掉固體雜質(zhì)。

     流動相不能用難揮發(fā)的酸或鹽，如,，磷酸鹽和硼酸鹽,，液相常用的TFA會抑制離子電離，也不建議使用;表面活性劑在質(zhì)譜中響應(yīng)很高,，尤其是ESI源,，所以，所有管和器具的清洗不能用洗潔精,，用來改善分離和色譜峰形的離子對試劑也應(yīng)慎用,，與質(zhì)譜聯(lián)用時建議使用的是甲酸、乙酸,、甲酸銨,、乙酸銨和氨水等。

     根據(jù)選用的離子源調(diào)整液相方法,，ESI源一般用0.3-0.6mL/min,，常規(guī)HPLC分析柱的規(guī)格是5μm，4.6×250mm的,，一般流速都是1mL/min,，可以采用柱后分流的方式來調(diào)整進入質(zhì)譜的流量。同時,，要根據(jù)進入質(zhì)譜的流量和樣品性質(zhì)調(diào)整霧化氣溫度和霧化氣的流量,。

     樣品測試結(jié)束后，需要清洗進樣管路,，清洗后停泵,，待離子源溫度降低后再選擇待機狀態(tài)。

     三.日常定期維護：

     前期,，機械泵隨著樣品的檢測會有有機溶劑進入泵中,，需要定期打開震氣閥震氣20min左右，震氣時間不能太長,，太長會導(dǎo)致泵油消耗過快,。根據(jù)檢測量來調(diào)整震氣的頻率，一般建議一周一次,。

     離子源腔體和取樣錐孔,、擋蓋用無塵紙和50%甲醇水清洗，一般一周一次,。

     機械泵的泵油需要定期更換,，一般半年更換一次，如果泵油看起來很臟,，需要提前更換,。更換泵油時需要將泵油全部倒出,，再更換新的泵油，不同品牌的泵油不能混用,。一般實驗室的質(zhì)譜儀都會在長假的時候進行大的維護,。

     一般日常維護除了更換泵油之外，都是不需要在卸真空的狀態(tài)下進行,，質(zhì)譜內(nèi)部的清理和維護一般比較少做到,，建議交給維修工程師來做，內(nèi)部金屬件可以用氧化鋁粉來打磨,，其他組件注意不要碰到有機試劑,，尤其是密封圈之類的。

     四.關(guān)機：

     關(guān)機需要先vent,，放空系統(tǒng),，再關(guān)閉機械泵。

     質(zhì)譜操作說明及注意事項

     質(zhì)譜操作說明及日常使用注意事項：

     1.開機

     1)打開主電源,，打開旁路泵電源,，打開毛細(xì)管加熱裝置(CPS)。

     2)觀察壓力顯示面板,，用▲▼箭頭調(diào)節(jié)黑條顯示位置,，使其調(diào)到Turbo Back 選項，按兩次進入鍵(〇),，開啟渦輪分子泵和背景泵;按返回鍵(〓)回到主面板,。觀察Turbo進度，使其達到正常運轉(zhuǎn)(黑條到頭),。按▼箭頭調(diào)節(jié)至AIMX選項,，觀察壓力顯示，使其在1*10-6以下,。*工作壓力為5*10-6以下。

     3)壓力達到要求后,，打開控制箱(RC Interface),，聽見滴的一聲，打開MA soft的軟件開始實驗設(shè)置,。

     2.軟件操作

     1)新建文件：File-New File新建文件,，出現(xiàn)主窗口;

     2)查看Global：RGA和Shutdown中的參數(shù)，確認(rèn)燈絲狀態(tài),，在Global：RGA燈絲點著一根,，而在Shutdown中燈絲是全部熄滅的，選擇OK;

     3)雙擊Scan mass,，選擇實驗?zāi)Ｊ?，里面有Bar,，Profile 和MID 三種模式，做全譜掃描時用Bar或Profile,，一般用Profile可調(diào)節(jié)掃描速率和精度,，比較。針對特定質(zhì)量數(shù)的掃描用MID模式,。當(dāng)采用Profile模式時,，可選擇掃描范圍。當(dāng)需要分段掃描時,，先選定Scan mass點擊一下,，再點擊工具欄上選項，可添加通道,。

     4)針對不同掃描范圍選擇不同檢測器時,，可雙擊檢測器單元，出現(xiàn)一對話框,，根據(jù)氣體壓力范圍選擇不同的監(jiān)測器,，F(xiàn)araday檢測器的壓力范圍是：1*10-5-10-10，SEM檢測器的壓力范圍是：1*10-7-10-14,。

     5)選中Scan mass,，按住Ctrl 可多選，點擊New Graph View,， 出現(xiàn)掃描窗口,。

     6)點亮燈絲，觀察控制箱上燈絲狀態(tài),，當(dāng)燈絲亮啟后,，點擊綠色開始按鈕，開始掃描,。

     注意：兩個燈絲不能同時打開,，勿點擊Degas analysis Source, 容易燒壞燈絲，點擊該按鈕前,，請與該公司工程師聯(lián)系,。

     7)當(dāng)需要查看各個循環(huán)次數(shù)時，可選擇要查看的Scan窗口,，點擊右鍵,，選擇Mode-Historical data，當(dāng)需要轉(zhuǎn)化到目前的掃描窗口時,，選擇Real time,。

     8)當(dāng)掃描結(jié)束時，點擊黃燈結(jié)束當(dāng)前循環(huán)后停止,，紅燈則馬上停止掃描,。

     9)可選擇路徑自己保存數(shù)據(jù)File-Save As , 可導(dǎo)出Excel 數(shù)據(jù)File-Export-File

     10)格式可選擇曲線顏色：Views—Trend View setup ; 在Windows中可改變窗口形式,。

     11)在Edit-Library-compound中可查看各物質(zhì)的峰含量圖譜，可點擊New進行添加新物質(zhì),。

     12)雙擊Repeated,，出現(xiàn)一對話框(Scan structure Cycles)，“Shutdown after Scanning”表示燈絲的狀態(tài),，在該框前打√,，則表示做完一個實驗燈絲則自動關(guān)掉;不打√，則表示做下個實驗時不需要開燈絲,。

     3.關(guān)機

     1)關(guān)閉MAS soft 軟件,，然后關(guān)閉控制箱。

     2)關(guān)泵,，使用▲▼箭頭調(diào)節(jié)黑條顯示位置,，使其調(diào)到Turbo Back 選項，按兩次進入鍵(〇),，關(guān)掉渦輪分子泵和背景泵;按返回鍵(〓)回到主面板,。觀察Turbo進度，當(dāng)聽到渦輪分子泵放氣的聲音,，觀察黑條進度,，確認(rèn)分子泵*關(guān)閉(黑條沒有)。再關(guān)掉CPS,，關(guān)閉旁路泵,，關(guān)閉主電源。

     4.注意事項：

     1)實驗過程中,，切勿用肥皂泡檢查氣路,，包括自己的氣路在檢查時也一定要與質(zhì)譜接口斷開(非常重要，很多質(zhì)譜都因為學(xué)生采用肥皂泡檢漏使得四級桿污染無法繼續(xù)使用);

     2)一般情況下,，質(zhì)譜要保持正常運行狀態(tài),，除非15天以上不用儀器，方可關(guān)閉,。因為質(zhì)譜需要一定時間穩(wěn)定(24h以上),，頻繁開關(guān)質(zhì)譜也會加速真空規(guī)污染。在預(yù)知停電的情況下,，請?zhí)崆瓣P(guān)掉質(zhì)譜,。

     3)泵油的更換：要經(jīng)常觀察泵油顏色,，當(dāng)變成黃褐色時應(yīng)立即更換,。如果儀器使用頻繁且氣體比較臟，則要求至少半年更換一次,，加入泵油量不超過上層液面,。

     4)QIC20散熱過濾網(wǎng)應(yīng)定期進行清洗(每兩個月清洗一次),，在夏天沒有空調(diào)的房間使用時盡量打開上蓋，以防影響儀器散熱,。

     5)毛細(xì)管在不與外部儀器連接時,，不要直接放置在臟的桌面上，盡量懸空放置;毛細(xì)管內(nèi)部的過濾器要定期清洗,，在拆裝過程中注意不要丟失部件,。

     6)在儀器運輸過程中，如果有油泵需要放出泵油(若干凈可進行收集以后繼續(xù)使用),、卸掉RF射頻頭,，單獨運輸。