| 一,、細(xì)胞基本屬性 | ||||
| 細(xì)胞名稱 | Jeko-1 人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞（STR鑒定正確） | |||
| 細(xì)胞別稱 | Jeko-1; JEKO-1; JeKo 1; Jeko1; JEKO1; JEKO | |||
| 種屬來源 | 人 | |||
| 年齡性別 | 78歲，女 | |||
| 組織來源 | 器官：外周血,；組織：套細(xì)胞淋巴瘤 | |||
| 生長特性 | 懸浮生長 | |||
| 細(xì)胞形態(tài) | 淋巴細(xì)胞樣 | |||
| 細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | |||
| 背景簡介 | 一位套細(xì)胞淋巴瘤患者的巨細(xì)胞變種顯示白血病轉(zhuǎn)變,，從其外周血單核細(xì)胞出發(fā)建立了MCL細(xì)胞株JeKo-1。JeKo-1細(xì)胞EB病毒陰性,，并表達(dá)一種B細(xì)胞表型的IgM,。JeKo-1細(xì)胞過表達(dá)cyclin D1、Bcl-2,、c-Myc及Rb蛋白,。Bcl-1/J(H)基因重排得到了PCR證實，JeKo-1細(xì)胞在SCID小鼠中高成瘤,。 | |||
| 生物安全等級 | 1 | |||
| 細(xì)胞規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 | |||
| 支原體檢測 | 無 | |||
| 抗原表達(dá)情況 | CD3-, CD5+, CD10+, CD19+ (verified at ATCC) | |||
| 基因表達(dá)情況 | CD3-, CD5+, CD10+, CD19+ (verified at ATCC) | |||
| 保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-3006 DSMZ; ACC-553 | |||
| 培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10%FBS+1%PS | |||
| 培養(yǎng)條件 | 氣相：95%空氣+5%二氧化碳,；溫度：37℃ | |||
| 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 | |||
| STR鑒定位點 | Amelogenin：X,X,；CSF1PO：9,12；D12S391：18,18,；D13S317：8,9,；D16S539：12,12；D18S51：13,15,；D19S433：13,13,；D21S11：30,33.2；D2S1338：17,25,；D3S1358：15,16,；D5S818：10,13,；D6S1043：20,20；D7S820：10,11,；D8S1179：11,14,；FGA：21,24；Penta E：17,21,；TH01：7,7,；TPOX：8,8；vWA：14,14,； | |||
| 細(xì)胞貨期 | 現(xiàn)貨,，1周左右 | |||
| 發(fā)貨方式 | 復(fù)蘇發(fā)貨（免運(yùn)輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運(yùn)輸費用） 順豐快遞 | |||
| 供應(yīng)限制 | 于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 | |||
| 特別說明 | 以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 | |||
| 二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | ||||
| 收貨方式 | T25瓶 | 凍存管 | ||
| 初步平衡 | 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，放37度培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4h,，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) | 無須平衡,，直接放入-80冰箱（不超過一周）或者液氮罐保存，建議盡早復(fù)蘇 | ||
| 傳代密度 | 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng) | 第二天換液并檢查細(xì)胞密度 | ||
| 傳代比例 | 傳代建議1：2傳代,，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 | 一管細(xì)胞建議接種到6cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 | ||
| 傳代方法 | 方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心3-5min分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液,，加1-2 mL培養(yǎng)基后輕輕吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 | ||
| 注意事項 | 懸浮細(xì)胞收貨注意事項： 1、收貨時需鏡下拍照（看密度,、狀態(tài)） 2,、靜置后需鏡下拍照（看整體密度） a.如密度50%以下，建議換液并豎瓶培養(yǎng) b.如密度50%-80%,，建議換液培養(yǎng),，隔天觀察密度 c.如密度90%，建議傳代 3,、換液及傳代處理前,，培養(yǎng)瓶豎著放置至少半小時（使細(xì)胞沉到瓶底）；收集上清,，必須將瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基（70ml）全部收集,！并用PBS（10ml）潤洗瓶底并收集！離心轉(zhuǎn)速為1000rpm,，5min,。 4.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞,。 5.因運(yùn)輸問題,，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象,。 | 1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完，檢查凍存管是否融化,，若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,，若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存； 2.為保證細(xì)胞的高存活率,，收到產(chǎn)品后,，請立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。 | ||
| 到貨須知 | 1.收到細(xì)胞后,，及時拍照記錄有無漏液,、渾濁或瓶身破損現(xiàn)象。 2.靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照（當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照）,，記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。 3.由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決,。 4. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子等,，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān),。 | |||
| 備注：客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務(wù)電話： 按 2，我們隨時給予解答,。 | ||||
| 三,、細(xì)胞凍存操作 | ||||
| 凍存液配方 | 無血清凍存液，液氮儲存 | |||
| 細(xì)胞密度 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為例 | |||
| 凍存方法 | a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,，裝入無菌離心管中,，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液,，用PBS清洗一遍,，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù),。 b,、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,，輕輕混勻,，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識,。 c,、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 | |||
| 注意事項 | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實驗方案 | |||
| 四,、售后服務(wù) | ||||
| 重發(fā)標(biāo)準(zhǔn) | 1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,，細(xì)胞丟失、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,，重發(fā)； 2.收到細(xì)胞未開封,，如出現(xiàn)污染狀況,，重發(fā)； 3.收到細(xì)胞3天內(nèi),，發(fā)現(xiàn)污染問題,，經(jīng)核實后，重發(fā),； 4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時后,，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,，經(jīng)核實后,，重發(fā)； 5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,，出現(xiàn)污染,，經(jīng)核實后，重發(fā),； 6.細(xì)胞活性問題,，請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,，經(jīng)核實后,，重發(fā)； 7.視具體情況而定,。 | |||
| 不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細(xì)胞污染,，不重發(fā)； 2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,，不重發(fā),； 3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā),； 4.細(xì)胞狀態(tài)不好,，未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片，不重發(fā),； 5.細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,，不重發(fā),； 6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā),； 7.視具體情況而定,。 | |||
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