一,、細胞基本屬性 | ||||
細胞全稱 | Raji人Burkitt's淋巴瘤細胞(STR鑒定正確) | |||
細胞別稱 | RAJI,;P1-Raji,;GM04671 | |||
種屬來源 | 人 | |||
年齡性別 | 男,;11歲 | |||
組織來源 | B淋巴細胞,;Burkitt's淋巴瘤 | |||
生長特性 | 懸浮生長 | |||
細胞形態(tài) | 淋巴母細胞 | |||
細胞代數 | 10代以內 | |||
背景介紹 | Raji細胞由PulvertaftRJV于1963年從一位11歲黑人男孩的左上頜骨的Burkitt淋巴瘤中分離建立的,,是個人類造血系統的連續(xù)傳代細胞,為B細胞起源,。該細胞中含有EBV,,需要在中操作;可作轉染宿主,。 | |||
STR位點 | Amelogenin:X,,Y;CSF1PO:10,,12,;D13S317:13;D16S539:8,,11,;D18S51:17;D19S433:14,,14.2,;D21S11:28,31,;D2S1338:22,;D3S1358:15,,16;D5S818:10,,13,;D7S820:10;D8S1179:14,,15,;FGA:19,27,;TH01:6,,7;TPOX:8,,13,;vWA:16,19,; | |||
STR鑒定圖片 | ![]() | |||
生物安全等級 | 2 | |||
細胞規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 | |||
支原體檢測 | 無 | |||
保藏機構 | ATCC; CCL-86 ATCC; CRL-7936 DSMZ; ACC-319 ECACC; 85011429,;中國醫(yī)學基礎醫(yī)學研究所細胞資源中心 | |||
倍增時間 | ~24-36 hours | |||
培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10% FBS+PS | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ | |||
凍存條件 | 無血清凍存液,,液氮儲存 | |||
倍增時間 | ~24-36 hours | |||
染色體 | 43~48 | |||
細胞貨期 | 現貨,,1周左右 | |||
運輸方式 | 復蘇發(fā)貨(T25瓶免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 | |||
供應限制 | 于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 | |||
特別說明 | 以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 | |||
二,、細胞培養(yǎng)操作 | ||||
收貨方式 | T25瓶 | 凍存管 | ||
收貨處理 | 觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁,,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài) | 收到細胞后,需立即轉入液氮凍存或直接復蘇 | ||
傳代密度 | 細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng) | 第二天換液并檢查細胞密度 | ||
傳代比例 | 傳代建議1:2傳代 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿,。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 | 一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 | ||
傳代方法 | 方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心3-5min分鐘,,棄去上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 方法二:可選擇半數換液方式,,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min,,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后輕輕吹勻,。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6 cm皿中,,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度,。 | ||
注意事項 | 1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。 2.因運輸問題,,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F象,。 | 1.收貨時若發(fā)現干冰化完,檢查凍存管是否融化,,若已融化需直接離心細胞接種觀察,,若未融化可以將細胞按正常步驟保存; 2.為保證細胞的高存活率,,收到產品后,,請立即解凍復蘇細胞。 | ||
到貨須知 | 1.收到細胞后,,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象,,干冰運輸的細胞檢查干冰是否揮發(fā),,細胞是否解凍,若有上述現象發(fā)生請及時和我們聯系,。 2.靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),,記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據);建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。 3.由于運輸的原因,,個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決,。 4.仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子等,,確保細胞培養(yǎng)條件一致,,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔,。 | |||
備注:客戶在細胞培養(yǎng)過程中,,有任何技術問題可以技術服務電話: 按 2,我們隨時給予解答,。 | ||||
三,、細胞凍存操作 | ||||
凍存液配方 | 無血清凍存液,液氮儲存 | |||
細胞密度 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為例 | |||
凍存方法 | a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,,裝入無菌離心管中,,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,,用PBS清洗一遍,,棄盡PBS,加 1 mL血清重懸細胞,,進行細胞計數,。 b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,,使細胞密度5x106~1x107/mL,,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,,注意凍存管做好標識,。 c、將凍存管放入-80℃冰箱,,24 h后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 | |||
注意事項 | 凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,,若有異常,,及時調整實驗方案 | |||
四、售后服務 | ||||
重發(fā)標準 | 1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失,、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā),; 2.收到細胞未開封,,如出現污染狀況,,重發(fā),; 3.收到細胞3天內,發(fā)現污染問題,,經核實后,,重發(fā); 4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后,,干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后,,絕大多數細胞未存活,經核實后,,重發(fā),; 5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后,出現污染,,經核實后,,重發(fā); 6.細胞活性問題,,請在收到產品 3 天內給我們提出真實的實驗結果,,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,,重發(fā),; 7.視具體情況而定。 | |||
不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細胞污染,,不重發(fā),; 2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā),; 3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,,不重發(fā); 4.細胞狀態(tài)不好,,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,,不重發(fā); 5.細胞培養(yǎng)時經其它處理導致細胞出現問題的,,不重發(fā),; 6.收到細胞發(fā)現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā); 7.視具體情況而定,。 |