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NCI-H460人大細胞肺癌細胞(STR鑒定正確)

參  考  價:面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號IM-H228

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更新時間:2024-12-30 07:51:56瀏覽次數(shù):144次

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NCI-H460人大細胞肺癌細胞(STR鑒定正確) Human Large Cell Lung Cancer Cells貨號:IM-H228 來源:ATCC規(guī)格:1×106cells/T25或1mL凍存管 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS傳代方法:1:2至1:3,,每周 3次 價格:1200元
一、細胞基本屬性
細胞名稱NCI-H460人大細胞肺癌細胞(STR鑒定正確)
細胞別稱NCI.H460; H460; H-460; NCIH460; NCI-HUT-460; NCI-460 ,;人大細胞肺癌細胞
種屬來源
年齡性別
組織來源
生長特性貼壁生長
細胞形態(tài)上皮細胞樣
細胞代數(shù)10代以內(nèi)
背景介紹NCI-H460細胞1982年由A.F. Gazdar建系,,源自一位患有大細胞肺癌的男性的胸腔積液。該細胞角蛋白,、波形蛋白陽性。NCI-H460細胞表達的p53 mRNA易于檢測,,其水平與正常肺細胞相當,,未表現(xiàn)出NCI-H460細胞DNA總體結(jié)構(gòu)異常。NCI-H460細胞角蛋白和波形蛋白纖維染色陽性,;神經(jīng)絲三聯(lián)體蛋白陰性,。
STR位點Amelogenin:X,Y,;CSF1PO:11,,12,;D13S317:13;D16S539:9,;D18S51:13,,15;D19S433:14,;D21S11:30,;D2S1338:17,25,;D3S1358:15,,18;D5S818:9,,10,;D7S820:9,12,;D8S1179:12,;FGA:21,23,;TH01:9.3,;TPOX:8;vWA:17,;
STR鑒定圖片NCI-H460人大細胞肺癌細胞STR鑒定圖片
生物安全等級 1
細胞規(guī)格1×106cellscells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測
保藏機構(gòu) ATCC; HTB-177 DSMZ; ACC-737
培養(yǎng)基90%RPMI-1640+10%FBS
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃
凍存條件無血清凍存液,液氮儲存
倍增時間~23-60 hours
致瘤性Yes, in nude mice.
染色體 53~65
細胞貨期現(xiàn)貨,,1周左右
運輸方式復(fù)蘇發(fā)貨(T25瓶免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞
供應(yīng)限制于科學(xué)研究,,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
特別說明以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
二,、細胞培養(yǎng)操作
收貨方式T25瓶凍存管
收貨處理觀察好細胞狀態(tài)后,,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)收到細胞后,,需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)第二天換液并檢查細胞密度
傳代比例 傳代建議1:2傳代
1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿,。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法
a,、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,使消化液浸潤所有細胞,,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,,1000 rpm離心5 min,,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻,。 c,、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,,棄去上清液,,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中,,加入約8 mL培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度,。
注意事項
1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。
2.因運輸問題,,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,,是正常現(xiàn)象,。
1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,,若未融化可以將細胞按正常步驟保存,;
2.為保證細胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,,請立即解凍復(fù)蘇細胞,。
到貨須知
1.收到細胞后,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否揮發(fā),,細胞是否解凍,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),,記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。
3.由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián)系,,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決,。
4.仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子等,,確保細胞培養(yǎng)條件一致,,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔,。
備注:客戶在細胞培養(yǎng)過程中,,有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務(wù)電話: 按 2,我們隨時給予解答,。
三,、細胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液,液氮儲存
細胞密度待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為例
凍存方法a、收集細胞,,裝入無菌離心管中,,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,,用PBS清洗一遍,,棄盡PBS,進行細胞計數(shù),。
b,、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,,使細胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,,注意凍存管做好標識。
c,、將凍存管放入-80℃冰箱,,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性,,若有異常,及時調(diào)整實驗方案
四,、售后服務(wù)
重發(fā)標準
1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,,細胞丟失、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴重漏液等,,重發(fā);
2.收到細胞未開封,,如出現(xiàn)污染狀況,,重發(fā);
3.收到細胞3天內(nèi),,發(fā)現(xiàn)污染問題,,經(jīng)核實后,重發(fā),;
4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后,,干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇 2 天后,絕大多數(shù)細胞未存活,,經(jīng)核實后,,重發(fā);
5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇 2 天后,,出現(xiàn)污染,,經(jīng)核實后,重發(fā),;
6.細胞活性問題,,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,,經(jīng)核實后,,重發(fā);
7.視具體情況而定。
不予重發(fā)
1.客戶操作造成細胞污染,,不重發(fā),;
2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā),;
3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā),;
4.細胞狀態(tài)不好,,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā),;
5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題的,,不重發(fā);
6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,,不重發(fā),;
7.視具體情況而定。

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HSF人皮膚成纖維細胞(免疫熒光鑒定)

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