| 一,、細(xì)胞基本屬性 | ||||
| 細(xì)胞名稱 | THP-1人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞（STR鑒定正確） | |||
| 細(xì)胞別稱 | THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); Tohoku Hospital Pediatrics-1,；人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞 | |||
| 種屬來源 | 人 | |||
| 年齡性別 | 男 | |||
| 組織來源 | 急性單核細(xì)胞白血病,，單核細(xì)胞 | |||
| 生長特性 | 懸浮生長 | |||
| 細(xì)胞形態(tài) | 單核細(xì)胞 | |||
| 細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | |||
| 背景簡介 | THP-1細(xì)胞從一名1歲的患有急性單核細(xì)胞性白血病的男孩的外周血中分離建立,。該細(xì)胞可以吞噬乳膠顆粒和激活的紅細(xì)胞,，細(xì)胞膜和胞漿內(nèi)均沒有免疫球蛋白,，表達(dá)C3R和FcR；可受佛波酯TPA誘導(dǎo)向單核系方向分化,；可作為轉(zhuǎn)染宿主,。 | |||
| STR位點 | Amelogenin：X，Y,；CSF1PO：11,，13；D13S317：8,，13,；D16S539：11，12,；D18S51：13,，14，15,；D19S433：12.2,，13,，14；D21S11：29,，30,，31.2；D2S1338：17,，18,；D3S1358：15，16,，17,；D5S818：11，12,；D7S820：10,；D8S1179：10，14,；FGA：22,，24，25,；TH01：7,，8，9.3,；TPOX：8,，11；vWA：16,； | |||
| STR鑒定圖片 |  | |||
| 生物安全等級 | 1 | |||
| 細(xì)胞規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 | |||
| 支原體檢測 | 無 | |||
| 保藏機構(gòu) | ATCC; TIB-202 DSMZ; ACC-16 ECACC; | |||
| 培養(yǎng)基 | 90% 1640+10% FBS+PS+ 0.05 mM (2-mercaptoethanol) | |||
| 培養(yǎng)條件 | 氣相：95%空氣+5%二氧化碳,；溫度：37℃ | |||
| 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 | |||
| 倍增時間 | ~36-72 hours | |||
| 受體表達(dá)情況 | complement (C3), expressed;Fc, expressed | |||
| 抗原表達(dá)情況 | HLA A2, A9, B5, DRw1, DRw2 | |||
| 基因表達(dá)情況 | lysozyme, HLA A2, A9, B5, DRw1, DRw2 | |||
| 染色體 | 80~84,，48~52 | |||
| 細(xì)胞貨期 | 現(xiàn)貨,，1周左右 | |||
| 運輸方式 | 復(fù)蘇發(fā)貨（T25瓶免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞 | |||
| 供應(yīng)限制 | 于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 | |||
| 特別說明 | 以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 | |||
| 二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | ||||
| 收貨方式 | T25瓶 | 凍存管 | ||
| 收貨處理 | 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁,，將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) | 收到細(xì)胞后,，需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇 | ||
| 傳代密度 | 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng) | 第二天換液并檢查細(xì)胞密度 | ||
| 傳代比例 | 傳代建議1：2傳代 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 | 一管細(xì)胞建議接種到6cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 | ||
| 傳代方法 | 方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心3-5min分鐘,，棄去上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 次傳代時，若培養(yǎng)基中有細(xì)胞碎片,，則將細(xì)胞懸液裝入無菌離心管中,，1000 rpm離心4 min，棄去上清液,，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻,，按1:1分到新的裝有10mL新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。 | 1） 將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液,，加1 mL 10%FBS 1640培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜,。第二天檢查細(xì)胞密度。 | ||
| 注意事項 | 1.運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞,。 2.因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,，是正?，F(xiàn)象。 | 1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,，檢查凍存管是否融化,，若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察，若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存,； 2.為保證細(xì)胞的高存活率,，收到產(chǎn)品后，請立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞,。 | ||
| 到貨須知 | 1.收到細(xì)胞后,，首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,，干冰運輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。 2.靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照（當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照）,，記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。 3.由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決,。 4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子等,，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,，責(zé)任由客戶自行承擔(dān),。 | |||
| 備注：客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務(wù)電話： 按 2,，我們隨時給予解答,。 | ||||
| 三、細(xì)胞凍存操作 | ||||
| 凍存液配方 | 無血清凍存液,，液氮儲存 | |||
| 細(xì)胞密度 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例 | |||
| 凍存方法 | a,、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min,，棄去上清液,，加 1 mL新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。 b,、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL,，輕輕混勻,，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識,。 c,、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 | |||
| 注意事項 | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常,，及時調(diào)整實驗方案 | |||
| 四,、售后服務(wù) | ||||
| 重發(fā)標(biāo)準(zhǔn) | 1.細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失,、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā),； 2.收到細(xì)胞未開封,，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā),； 3.收到細(xì)胞3天內(nèi),，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實后,，重發(fā),； 4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,，經(jīng)核實后，重發(fā),； 5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實后,，重發(fā),； 6.細(xì)胞活性問題，請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,，用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,，經(jīng)核實后，重發(fā),； 7.視具體情況而定,。 | |||
| 不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細(xì)胞污染,，不重發(fā)； 2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,，不重發(fā),； 3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā),； 4.細(xì)胞狀態(tài)不好,，未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片，不重發(fā),； 5.細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,，不重發(fā)； 6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,，不重發(fā),； 7.視具體情況而定。 | |||
| 五,、參考文獻(xiàn) | ||||
| Therapeutic potency of compound RMY-205 for pulmonary fibrosis induced by SARS-CoV-2 nucleocapsid protein 2023, Cell Chemical Biology 30, 261–277 March 16, 2023 a 2023 Elsevier Ltd. 作者：Zhi-yuan Zhang, Cui-yu Ju, Liu-zheng Wu, Tianwei Lin, Fu-nan Li, Qiao Wu 細(xì)胞：THP-1 2022年影響因子/JCR分區(qū)：9.039/Q1 | ||||
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