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KYSE150人食管鱗癌細(xì)胞

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號IM-H288

品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所在地

更新時(shí)間:2024-12-30 07:05:42瀏覽次數(shù):137次

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KYSE150人食管鱗癌細(xì)胞 Human Esophageal Cancer Cells貨號:IM-H288 來源:DSMZ規(guī)格:1x106cells/T25或1mL凍存管 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長培養(yǎng)基:48.5%RPMI-1640+48.5%F-12+2% FBS+1% P/S傳代方法:1:2至1:3,,每周 2-3次 價(jià)格:1200元
一,、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱KYSE150人食管鱗癌細(xì)胞
細(xì)胞別稱KYSE 150; KYSE150; Kyse150; KY150,;人食管鱗癌細(xì)胞
種屬來源
年齡性別女性,49歲
組織來源食管鱗癌
生長特性 貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
背景簡介Established from the poorly differentiated esophageal squamous cell carcinoma resected from upper (cervical) esophagus of a 49-year-old Japanese woman after receiving radiotherapy (tumor was invading contiguous structures); described as carrying amplified oncogenes, c-erb-B (8x) and cyclin D1 (4x) and producing tumors in nude mice.
細(xì)胞代數(shù)10代以內(nèi)
生物安全等級1
細(xì)胞規(guī)格1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測
保藏機(jī)構(gòu)DSMZ; ACC-375
培養(yǎng)基

48.5%RPMI-1640+48.5%F-12+2% FBS+1% P/S

培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃
凍存條件無血清凍存液,,液氮儲存
倍增時(shí)間~13.7小時(shí) (PubMed=1728357); 23小時(shí) (PubMed=25984343);
致瘤性Yes, in nude mice
細(xì)胞貨期現(xiàn)貨,1周左右
運(yùn)輸方式復(fù)蘇發(fā)貨(T25瓶免運(yùn)輸費(fèi)用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞
供應(yīng)限制于科學(xué)研究,,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
收貨方式T25瓶凍存管
收貨處理觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,,75%酒精消毒瓶壁,,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)收到細(xì)胞后,,需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)第二天換液并檢查細(xì)胞密度
傳代比例 傳代建議1:2傳代
1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法
a,、棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
b,、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-3 min(視細(xì)胞情況而定),,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化,。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c,、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,,加入約4 mL培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
注意事項(xiàng)
1.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。
2.因運(yùn)輸問題,,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,,是正常現(xiàn)象,。
1.收貨時(shí)若發(fā)現(xiàn)干冰化完,,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存,;
2.為保證細(xì)胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,,請立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。
到貨須知
1.收到細(xì)胞后,,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,,干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
3.由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子等,,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
備注:客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務(wù)電話: 按 2,,我們隨時(shí)給予解答。
三,、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液,,液氮儲存
細(xì)胞密度待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為例
凍存方法a,、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,,1000 rpm條件下離心4 min,,棄去上清液,用PBS清洗一遍,,棄盡PBS,,加 1 mL血清重懸細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),。
b,、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL,,輕輕混勻,,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識,。
c,、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案
四,、售后服務(wù)
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)
1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失,、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā),;
2.收到細(xì)胞未開封,,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā),;
3.收到細(xì)胞3天內(nèi),,發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā),;
4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā);
5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時(shí)并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,,出現(xiàn)污染,,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā),;
6.細(xì)胞活性問題,,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā);
7.視具體情況而定,。
不予重發(fā)
1.客戶操作造成細(xì)胞污染,,不重發(fā);
2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,,不重發(fā),;
3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā),;
4.細(xì)胞狀態(tài)不好,,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā),;
5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,,不重發(fā);
6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,,不重發(fā),;
7.視具體情況而定。

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