固相萃取柱的分類主要基于?填料基質(zhì)?和?作用機理?兩個維度,具體如下:
以硅膠為支撐基質(zhì),通過硅-氧-硅鍵連接,,適用于極性化合物分離?,。
2、聚合物基質(zhì)小柱?采用高分子聚合物(如聚苯乙烯-二乙烯苯)作為基質(zhì),,pH適用范圍廣(全pH值),,吸附位點多,應用領域更寬泛?,。
3?,、吸附型小柱?包括佛羅里硅土、石墨化碳,、氧化鋁等,,用于特定類型化合物的吸附。
?1,、正相固相萃取柱?
*固定相?:極性物質(zhì)(如硅膠,、氧化鋁、硅鎂吸附劑)?。
*適用對象?:極性或中等極性化合物,,通過氫鍵,、π—π鍵等作用吸附目標物?。
2,、反相固相萃取柱?
?*固定相?:非極性或弱極性物質(zhì)(如C18,、C8、苯基鍵合硅膠)?,。?
*適用對象?:中等到非極性化合物,,通過范德華力吸附?。
3,、離子交換柱?
?*固定相?:帶電荷的樹脂(如磺酸基陽離子交換柱,、季銨基陰離子交換柱)?。
*?適用對象?:帶電化合物(如氨基酸,、多肽),,通過靜電作用吸附?。
4?,、螯合作用柱?
*固定相?:含螯合基團的填料(如乙二胺型,、亞氨乙酸型)。
*適用對象:重金屬離子吸附?,。
1?、活化(預處理)?
?*反相柱?:先用甲醇或強極性溶劑潤濕,,再用去離子水或緩沖液平衡,,確保填料充分濕潤?。
*?正相柱?:用樣品所在的有機溶劑潤濕(如正己烷)?,。
*離子交換柱?:用去離子水或低離子強度緩沖液平衡?,。
2、上樣?*將樣品溶液緩慢通過活化后的SPE柱,,目標物或雜質(zhì)被吸附在填料上?,。
3?、淋洗?*用弱溶劑沖洗,,去除弱吸附的干擾物(如用5%甲醇水溶液淋洗反相柱)?,。
4、洗脫?*選擇強溶劑(如甲醇,、乙腈)將目標物從填料上洗脫并收集?,。
(二)不同應用場景的差異操作
1、保留目標物模式?*用于富集目標物時,,淋洗步驟僅去除雜質(zhì),,洗脫時收集目標物?,。
2、保留雜質(zhì)模式?*用于去除雜質(zhì)時,,目標物直接通過SPE柱進入收集液,,洗脫步驟用于去除吸附的雜質(zhì)(如食品分析中去除色素)?。
1,、保持填料濕潤:若活化后填料變干,,需重新活化?。
2,、控制流速:過快會導致吸附不充分,,一般通過真空泵或注射器手動調(diào)節(jié)?。
3,、洗脫溶劑選擇:需與目標物極性匹配,,反相柱多用有機溶劑,正相柱用中等極性溶劑?,。