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河豚魚素(tetradotoxin,簡寫為TTX)系小分子量非蛋白質(zhì)神經(jīng)素,,中潛伏期短,,死亡率高,素吸收后迅速作用于末梢神經(jīng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng),,使神經(jīng)傳導產(chǎn)生障礙,,先感覺神經(jīng)麻痹,而后運動神經(jīng)麻痹,,嚴重者腦干麻痹導致呼吸循環(huán)衰竭,。河豚魚的表皮、內(nèi)臟,、血液,、睪丸、卵巢,、肝,、脾、眼球等不同組織中含有河豚魚素(tetrodotoxin,,TTX),,它是一種劇的非蛋白神經(jīng)素。
河豚魚素化學性質(zhì)和熱性質(zhì)均很穩(wěn)定,,鹽腌或日曬等一般烹調(diào)手段均不能將其破壞,,只有在高溫加熱30min以上或在堿性條件下才能被分解。220℃加熱20-60min可使素全部被破壞,。中潛伏期很短,,短至10-30min,長至3-6h發(fā)病,,發(fā)病急,,如果搶救不及時,中后較快的10min內(nèi)死亡,,遲4-6h死亡,。中后也缺乏有效的解救措施。
河豚魚素ELISA試劑盒基于競爭性ELISA酶聯(lián)免疫的方法,,河豚魚素的抗體包被于酶標孔內(nèi),,樣品與河豚魚素-酶標記物加入到微孔內(nèi),若樣品中有河豚魚素殘留,,它將與河豚魚素-酶標記物共同競爭酶標板包被的抗體,。加入TMB底物后,,顏色發(fā)生變化,經(jīng)酶標儀檢測讀數(shù)后確定樣品中河豚魚素的含量,。顏色的深淺與素的殘留量成反比,。
注意事項
1、標準品中含有河豚魚素,,請小心使用,。
2、不要使用過期的試劑盒,。
3、不同批次的試劑盒不要混用,,抗體和微孔板具有盒與批次的特異性,。
4、盡量保持室溫(25±2.5)°C,,避免在通風口操作防止溫度過低,,過熱和/或者蒸發(fā)。同樣的,,不要在陽光直射下實驗,,防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間,,如果工作臺溫度過低,,應(yīng)該鋪墊若干紙巾或者其他物料。
5,、水質(zhì)量很重要,,確保使用蒸餾或者去離子水。
6,、加入樣品或者試劑到空的微孔板時,,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接觸,。
7,、孵育時間的計算越規(guī)范越好,保持添加標準品的*性,,先添加標準品后添加樣品,。
8、從低濃度到高濃度地添加標準品,,降低影響標準品曲線質(zhì)量的風險,。
9、將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中,,冷藏保存,。
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