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軟海綿酸(Okadaic acid,OA)是一種由甲藻類(如鰭藻屬和原甲藻屬)產(chǎn)生的腹瀉性貝類素(DSP toxins),,可引起人類急性惡心,、嘔吐、腹瀉和腹痛等癥狀,。腹瀉性貝相關(guān)的有多種化學(xué)素,它們是親油性的聚醚類或大環(huán)內(nèi)酯類化合物,,已經(jīng)確認DSP的成分有3個組分:第1組酸性素-軟海綿酸(OA)及其衍生物鰭藻素(DTX1,,DTX2,,DTX3);第2組分為中性素-扇貝素(PTXs)組,;第3組為其他素-蝦夷扇貝素(YTX)及其衍生物45-OHYTX,,至今至少有12種成分,其中9種的結(jié)構(gòu)已明確,,與腹瀉有關(guān)的主要是第1組分。FDA制定的高水平為0.2ppm,。歐盟建立了軟海綿酸(OA)160ug/kg(ng/g或者ppb)的水平,。
腹瀉性貝類素ELISA試劑盒基于競爭性ELISA酶聯(lián)免疫的方法,腹瀉性貝類素的抗體包被于酶標孔內(nèi),,樣品與腹瀉性貝類素-酶標記物加入到微孔內(nèi),若樣品中有腹瀉性貝類素殘留,,它將與貝類素-酶標記物共同競爭酶標板包被的抗體,。加入TMB底物后,顏色發(fā)生變化,,經(jīng)酶標儀檢測讀數(shù)后確定樣品中腹瀉性貝類素的含量,。顏色的深淺與素的殘留量成反比。
腹瀉性貝類素ELISA試劑盒有以下特點:一步法,,即用設(shè)計,操作簡便,;高靈敏度(0.1ng/g或者ppb),,低檢測限(貝類肉樣10ng/g、水樣2ppb),;高回收率(>80%),;高重復(fù)性,;快速(1小時內(nèi)完成檢測)。
注意事項
1,、標準品中含有腹瀉性貝類素,請小心使用,。
2,、不要使用過期的試劑盒。
3,、不同批次的試劑盒不要混用,抗體和微孔板具有盒與批次的特異性,。
4,、盡量保持室溫(25±2.5)°C,避免在通風(fēng)口操作防止溫度過低,,過熱和/或者蒸發(fā)。同樣的,,不要在陽光直射下實驗,,防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間,,如果工作臺溫度過低,,應(yīng)該鋪墊若干紙巾或者其他物料。
5,、水質(zhì)量很重要,,確保使用蒸餾或者去離子水。
6,、加入樣品或者試劑到空的微孔板時,,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接觸,。
7,、孵育時間的計算越規(guī)范越好,,保持添加標準品的*性,先添加標準品后添加樣品,。
8,、從低濃度到高濃度地添加標準品,降低影響標準品曲線質(zhì)量的風(fēng)險,。
9,、將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中,冷藏保存,。
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