熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具。是由光源、濾板系統(tǒng)和光學系統(tǒng)等主要部件組成。熒光顯微鏡利用一定波長的光激發(fā)標本發(fā)射熒光,通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標本的熒光圖像,。細胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,,受紫外線照射后可發(fā)熒光,;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,,熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一。
熒光顯微鏡的使用方法
1,、用窗簾遮蔽光線,,關(guān)閉房間內(nèi)的電燈,除去熒光顯微鏡的防塵罩,,確保熒光顯微鏡燈室通風良好,、無遮蓋。裝上汞燈燈箱,,并轉(zhuǎn)動燈箱卡圈上的撥桿,,將燈箱與鏡臂連接。
2,、將汞燈燈箱的電源插頭插入熒光電源箱后的插座,,再將熒光電源箱的插頭插入220V外接電源。
3,、打開熒光顯微鏡電源開關(guān),,電壓表顯示出電源電壓,如電源電壓波動不大于額定電壓值的5%,,即可按下啟動開關(guān)點燃汞燈,,如因天氣太冷或電壓不穩(wěn)定等原因,一次啟動未點燃汞燈,,可以多按幾次,。待超高壓汞燈弧光達到穩(wěn)定狀態(tài)并達到Zda發(fā)光效率,即可開始工作,。
4,、燈泡的調(diào)中:
?、偃芜x一塊標本放在熒光顯微鏡載物臺上。
?、谵D(zhuǎn)動鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移出光路,,轉(zhuǎn)動濾色片組轉(zhuǎn)換手輪,將紫光(V)或藍光(B)或綠光(G)激發(fā)濾色片組轉(zhuǎn)入光路,,并將25熒光物鏡轉(zhuǎn)入光路,。
③調(diào)節(jié)粗微調(diào)手輪,,將標本像調(diào)焦清晰。
?、芮昂笸苿哟怪闭彰髌饔疫叺木酃忡R調(diào)焦推桿,,使視場光欄成像清晰,轉(zhuǎn)動視場光欄撥桿將視場光欄收小,,調(diào)節(jié)視場光欄調(diào)中螺釘使視場光欄居中,,然后再將視場光欄開至Zda。
?、蒉D(zhuǎn)動鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移入光路,,前后調(diào)節(jié)燈箱上的聚光鏡撥桿,使汞燈的弧光在視場內(nèi)成像清晰,。
?、拚{(diào)整燈箱上的燈泡水平調(diào)節(jié)螺釘和垂直調(diào)節(jié)螺釘,使汞燈的弧光居中,。
?、哒{(diào)整反光鏡水平調(diào)節(jié)螺釘和垂直調(diào)節(jié)螺釘,使光源的反射像與汞燈的弧光分開,。
?、噢D(zhuǎn)動聚光鏡旋鈕把聚光鏡移出光路,此時視場照明均勻,。