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毛細(xì)管電泳儀的注意事項

閱讀:1419      發(fā)布時間:2023-12-15
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毛細(xì)管電泳儀以彈性石英毛細(xì)管為分離通道,,以高壓直流電場為驅(qū)動力,,依據(jù)樣品中各組分的淌度(單位電場強度下的遷移速度)和分配行為的差異而實現(xiàn)各組分分離。
 
工作原理
 
毛細(xì)管電泳柱中裝載電解液運行時,,由于管壁硅羥基的存在會產(chǎn)生電滲流,,電滲流將推動整個毛細(xì)管柱內(nèi)的溶液定向移動。與一般色譜技術(shù)的主要區(qū)別在于其分離原理不是基于組分在流動相和固定相中分配系數(shù),,而是在電場作用下離子遷移速度的不同,。
 
注意事項
 
1,、進(jìn)樣系統(tǒng):其較常用的方式主要為流體動力學(xué)進(jìn)樣和電遷移進(jìn)樣,該進(jìn)樣系統(tǒng)結(jié)構(gòu)包括動力和計時控制部件,、毛細(xì)管和樣品瓶及緩沖液瓶的位置變換控制部件等,。
 
2、毛細(xì)管清洗裝置和緩沖液填充系統(tǒng):酸堿活化毛細(xì)管可保證CE分離結(jié)果,,此外,,填充緩沖液也是必須的步驟之一。一般毛細(xì)管清洗或緩沖液填灌采用正壓或負(fù)壓來實現(xiàn),,要求系統(tǒng)具有一定的密閉性,。商品化的儀器通常將毛細(xì)管清洗過程與進(jìn)樣過程共享壓力控制機構(gòu),但計時以分鐘為單位,,對進(jìn)樣精度有所影響。
 
3,、毛細(xì)管及其溫控系統(tǒng):CE分析實驗過程中,,焦耳熱效應(yīng)降低分離效率且在一定程度上影響分析結(jié)果的重復(fù)性。因此需要設(shè)計一個溫度可調(diào)的恒溫環(huán)境來降低焦耳熱效應(yīng)同時規(guī)避外界溫度變化對毛細(xì)管分離結(jié)果造成的影響,。風(fēng)冷和液冷兩種溫控方式較為常用,。風(fēng)冷控溫是通過控制空氣對流實現(xiàn)但效果不佳,。液冷控溫是將毛細(xì)管置于恒溫液體中,一般以水為冷卻介質(zhì),,由專門的制冷系統(tǒng)進(jìn)行冷卻或恒溫并經(jīng)由流路進(jìn)行循環(huán)。其效果良好,,故為常用的溫控方式,。
 
4,、檢測系統(tǒng):CE應(yīng)用紫外檢測器最為廣泛,,其采用柱上檢測方式,,結(jié)構(gòu)簡單,、操作方便,使用前需在適當(dāng)位置將毛細(xì)管外壁涂層的彈性保護(hù)層聚酰亞胺膜剝離,,讓透明部分對準(zhǔn)光路,??赏ㄟ^灼燒、硫酸腐蝕或者刀片刮除等方式實現(xiàn)涂層剝離,。

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