詳細(xì)介紹
NCI-H23(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)說(shuō)明書訂購(gòu)流程:
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產(chǎn)品名稱 | NCI-H23(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)說(shuō)明書 |
英文名稱 | NCI-H23 (human non small cell lung cancer cell) |
規(guī)格 | 5×106cells/瓶×2 |
NCI-H23(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)說(shuō)明書功能:
(1) 血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素,。
(2) 表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3) 與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān),。
生理變化:
(1) 主動(dòng)脈硬化,。
(2) 主動(dòng)脈瘤
(3) 主動(dòng)脈鈣化。
基本特性:
(1) 組織來(lái)源于正常大鼠大動(dòng)脈組織,。
(2) 鑒定:肌動(dòng)蛋白,,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3) 原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存,。
(4) 每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml,。
(5) 肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證,。
(6) 不含有HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。
NCI-H23(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)說(shuō)明書
牛血清白蛋白溶液 BOVINE SERUM ALBUMIN, 20MG/ML 1ML 生物技術(shù)級(jí)
牛血清白蛋白溶液 BOVINE SERUM ALBUMIN, 20MG/ML 5ML 生物技術(shù)級(jí)
TMB 溶液 TMB LIQUID -1 COMPONENT 100ML 生物技術(shù)級(jí)
TMB 溶液 3,3',5,5'-TETRAMETHYL BENZIDINE (TMB) LIQUID - 1 COMPONENT 1L 生物技術(shù)級(jí)
RNA Marker RNA MARKER - 16S, 23S 2.5MG
TBE 50x濃縮液 EZ TBE, 50X CONCENTRATE 10 X 10 ML 超純級(jí)
TBE 50x濃縮液 EZ TBE, 50X CONCENTRATE 20X10ML 超純級(jí)
TBE 50x濃縮液 EASY TBE 50X CONCENTRATE- 20ML 10 X 20 ML 超純級(jí)
TBE 50x濃縮液 EASY TBE 50X CONCENTRATE-20ML 20X20ML 超純級(jí)
乳糖 LACTOSE 12KG 美國(guó)國(guó)家處方級(jí)
乳糖 LACTOSE 50KG 美國(guó)國(guó)家處方級(jí)
乳糖 LACTOSE 5KG 美國(guó)國(guó)家處方級(jí),
Tris溶液 TRIS 1.5M PH 8.8 77-86-1 500ML 超純級(jí)
Tris溶液 TRIS 0.5M PH 6.8 500ML 生物技術(shù)級(jí)
Tris溶液 2M TRIS PH 7.8 77-86-1 500ML 超純級(jí)
Tris溶液 2M TRIS PH 7.5 77-86-1 1L 超純級(jí)
ALKALINE PHOSPHATASE PH 9.5 4L
鹽酸胍, 8M 溶液 GUANIDINE HCL, 8M SOLUTION 50-01-1 4L 生物技術(shù)級(jí)
G418硫酸鹽, 100mM溶液 G418 ANTIBIOTIC SOLUTION 20ML 生物技術(shù)級(jí)
HEPES 1 M 無(wú)菌溶液, pH 7.3 STERILE HEPES, 1M, PH 7.3 100ML 生物技術(shù)級(jí)
HEPES 1 M 無(wú)菌溶液, pH 7.3 STERILE HEPES, 1M, PH 7.3 500ML 生物技術(shù)級(jí)
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮,、分散,,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,吸管分裝混合液,,傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,,加入胰消化酶消化,、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值,。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線