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GH3(大鼠垂體瘤細胞)說明書細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號21875-091)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
GH3(大鼠垂體瘤細胞)說明書細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時,，可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學,、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設(shè)備。

0.5%甘露醇發(fā)酵管 毒扁豆堿 ?酸敏感離子通道1IgG

0.5%水楊苷發(fā)酵管 γ-倒捻子素 ?肌1側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白22號染色體IgG

0.5%山梨醇發(fā)酵管 地黃苷A ?細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1/絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶5IgG

0.5%乳糖發(fā)酵管 地黃苷D ?兔抗人,、大,、小鼠磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1IgG

0.5%棉子糖發(fā)酵管 冬綠苷 ?兔抗人、小鼠磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1IgG

七葉苷發(fā)酵管 二氫槲皮素 ?兔抗人、大,、小鼠磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1IgG

無菌液體石蠟 二氫楊梅素 ?p53凋亡刺激蛋白1IgG

蛋白胨水 莪術(shù)醇 ?P53凋亡刺激蛋白2IgG

Kovacs 氏靛基質(zhì)試劑 二氫丹參酮Ⅰ ?血管緊張素原IgG

硝酸鹽肉湯 1,，8-二羥基蒽醌 ?血管緊張素IIgG

無菌硝酸鹽肉湯 1,5-O-二咖啡酰奎 ?血管緊張素Ⅱ-1型受體IgG

硝酸鹽還原試劑 1,3-O-二咖啡?？??血管緊張素Ⅱ-2型受體IgG

明膠生化管 莪術(shù)烯 ?活化復(fù)制因子1IgG

營養(yǎng)瓊脂NA 莪術(shù)二酮 ?兔抗人,、大、小鼠磷酸化ATRIgG

芽孢桿菌培養(yǎng)基基礎(chǔ) 二氫歐山芹醇當歸 ?活化復(fù)制因子2IgG

阿須貝氏Ashby培養(yǎng)基 兒茶素 ?兔抗人,、大,、小鼠、猴磷酸化活化復(fù)制因子2phospho ATF 2IgG

根瘤菌培養(yǎng)基 YM 3,5-O-二咖啡?；??活化轉(zhuǎn)錄因子3IgG

根瘤菌培養(yǎng)基Ⅱ基礎(chǔ) 4,5-O-二咖啡?？??活化轉(zhuǎn)錄因子4IgG

硅酸鹽細菌培養(yǎng)基 鵝去氧膽酸 ?活化轉(zhuǎn)錄因子6IgG

固氮莖瘤根瘤菌培養(yǎng)基 二十八烷醇 ?自噬相關(guān)蛋白1IgG

馬丁培養(yǎng)基 二氫小檗堿 ?自噬相關(guān)蛋白3IgG

高氏合成一號瓊脂培養(yǎng)基 二氫醉椒素 ?自噬相關(guān)蛋白4AIgG

聯(lián)合固氮菌培養(yǎng)基 二氫麻醉椒苫素 ?自噬相關(guān)蛋白4CIgG

馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基不含氯霉素 二氫姜黃素 ?自噬相關(guān)蛋白4DIgG

麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基 二苯乙烯苷 ?磷酸化自噬相關(guān)蛋白1IgG

MRS 培養(yǎng)基乳酸細菌培養(yǎng)基 沒食子兒茶素 ?自噬相關(guān)蛋白7IgG

光合細菌培養(yǎng)基Ⅰ 二羥丙茶堿E ?G1氨基丁酸A型受體相似蛋白2IgG

乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 3,29-二苯甲酰基栝 ?自噬相關(guān)蛋白9AIgG

伊紅美藍瓊脂EMB β,，β’-二甲基丙 ?自噬相關(guān)蛋白9BIgG

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