本試劑盒采用競爭elisa方法,,在微孔板包被有右旋糖酐偶聯(lián)抗原,加入右旋糖酐標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,,游離右旋糖酐與微孔條上預(yù)包被的右旋糖酐偶聯(lián)抗原互相競爭抗右旋糖酐抗體酶標(biāo)記物,,用 TMB 底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,,用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下進(jìn)行檢測,,吸光值與樣品中右旋糖酐含量成反比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中右旋糖酐的含量,。
操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同),、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用,。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外,。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘,。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
客戶須知:
1,、液體類標(biāo)本(細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿,、血清,、血漿、尿液,、胸水,、腹水,、腦脊液等),。
2、樣本保存:請盡早檢測,,2-8℃保存一天,;需更長時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,。如需周期收集樣本,請將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號后,,置-20℃或-70℃保存,;
3、請?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬,、樣本數(shù)量,、待測指標(biāo)及其他特殊要求。