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　　兔ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作：

　　1、試劑配制:洗滌液按1:20三蒸水稀釋;標(biāo)準(zhǔn)品在用前每管加入200 ?l蒸餾水溶解即可(具體見說(shuō)明書);底物工作液應(yīng)在顯色前5-10 min將OPD片放入底物稀釋液中溶解,每片加5 ml液,。

　　2、標(biāo)本收集:采集血清或體液盡早檢測(cè),2~8 ℃保存一天需更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃)保存,避免反復(fù)凍融;組織(胎肝,、胎腦等)實(shí)驗(yàn)前一天組織勻漿,用90%體積RIPA裂解液(PH 8.0,50 mM Tris HCl、1% NP-40,、,0.25% sodium deoxycholate,、150 mM NaCl,、1 mM EDTA)和10%體積的10 mM PMSF進(jìn)行組織勻漿(10%),冰上裂解30 min,12000×20min后取上清,4℃待用。

　　3,、器材準(zhǔn)備:酶標(biāo)儀、37 ℃恒溫烤箱,、濾紙,、托盤,、量筒、燒杯,、各種規(guī)格的移液器,、離心管、管架和廢液缸等,，三蒸水自備。

　　兔ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)流程圖：

LEP elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。
仔細(xì)收集上清,，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心,。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)該再次離心,。
3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí),，用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右,。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性,。
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書有異,，以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。