詳細介紹
注意事項:
①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
④底物A應揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。?
產(chǎn)品名稱:中央無漿體PCR檢測試劑盒
英文名稱:Anaplasma centrale PCR
規(guī)格:50T
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復凍融,。
運輸:低溫,、避光,快遞免費送貨上門,。
?PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便,、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,,無放射性污染、易推廣,。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液,、洗嗽液,、毛發(fā)、細胞,、活PCR技術概論,。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構,,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,,否則會形成引物二聚體,,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
TAMRA-酪蛋白交聯(lián)試劑20mg
CLIC2英文名稱:CCDC144NL人結(jié)核菌桿(TB)抗體(IgA)免疫試劑盒
CLEC9A英文名稱:Cux2人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒
CLEC9A英文名稱:CCDC146人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)免疫試劑盒
CDH12英文名稱:CCDC147人結(jié)蛋白(DES)抗體免疫試劑盒
Cadherin 20英文名稱:CCDC158人結(jié)蛋白(Des)免疫試劑盒
CDH29英文名稱:CDH11人角化細胞生長因子(KGF)免疫試劑盒
CD200R英文名
白花前胡進口/國產(chǎn)CD8 CD8抗體含量:HPLC≥98%
白花前胡進口/國產(chǎn)CD8 alpha CD8抗體含量:HPLC≥98%
貝母辛進口/國產(chǎn)Adiponectin Receptor 1 脂聯(lián)受體1抗體含量:HPLC≥98%
地奧司明進口/國產(chǎn)Salmonella typhimurium 鼠傷寒沙門氏菌含量:HPLC≥98%
香蒲新苷進口/國產(chǎn)Salmonella paratyphi a 型副傷寒沙門氏菌抗體含量:HPLC≥98%
哈巴俄苷進口/國產(chǎn)Salmonella enteritidis/SE 腸炎沙門氏菌抗體含量:HPLC≥98%
哈巴苷進口/國產(chǎn)pig cholerae salmonella 豬霍亂沙門氏菌抗體含量:HPLC≥98%
中央無漿體PCR檢測試劑盒產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,,無非特異性擴增,;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測,;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒,。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份