產品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增,；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝,；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測,；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒,。
準備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產品說明書                                   1份
?產品名稱：箭毒蛙壺菌PCR檢測試劑盒多少錢
英文名稱：Batrachochytrium dendrobatidisPCR
規(guī)格：50T
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融,。
運輸：低溫,、避光，快遞免費送貨上門,。
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PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合,；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,；
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中,，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便,、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,，一般在2～4 小時完成擴增反應,。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素,，無放射性污染,、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,。可直接用臨床標本如血液,、體腔液,、洗嗽液、毛發(fā),、細胞,、活PCR技術概論。
注意事項：
①加入試劑的順序應*,，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),，避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,，有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時,，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,，密封保存,，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,，使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存,。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質前使用,。
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵,，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,，只要知道任何一段模板DNA序列,， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp,，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜,，特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳,，G+C過多易出現非特異條帶,。ATGC機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內部出現二級結構,，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體,，產生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數第二個堿基,，應嚴格要求配對,，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol,，以最低引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,，且可增加引物之間形成二聚體的機會,。
腔腸素20mg

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