詳細介紹
注意事項:
①加入試劑的順序應*,,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),,避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,,使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質前使用,。
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產品名稱:牛細小病毒PCR檢測試劑盒多少錢
英文名稱:Bovine Parvovirus (BPV)PCR
規(guī)格:50T
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復凍融。
運輸:低溫,、避光,,快遞免費送貨上門。
?PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便,、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,,無放射性污染,、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,。可直接用臨床標本如血液,、體腔液,、洗嗽液、毛發(fā),、細胞,、活PCR技術概論。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物,、酶,、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC機分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,,避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,,產生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,,應嚴格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以最低引物量產生所需要的結果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會,。
鈣黃綠素藍酰酯20mg
Snake poison Protein肺癌轉移相關蛋白抗體
Leptin候選腫瘤抑制基因MARVELD1抗體
Leptin receptor成熟T淋巴細胞增蛋白1抗體
Lpin1 protein絲裂原活化蛋白激酶8相互作用蛋白1抗體
Lumbrokinase肌球蛋白輕鏈6抗體
Livin (Inhibitors of apoptosis proterins Livin)磷酸化肌細胞增強因子2C抗體
p38 MAPK/MKK3/MAPKK14磷酸化黑色素瘤細胞粘附分子CD146抗體versi#
二歐山芹醇當歸酸酯進口/國產HBXIP 型肝炎病X蛋白相互作用蛋白含量:含量測定
紅花苷-I進口/國產ILP2 抑制細胞凋亡樣蛋白2抗體含量:
紅花苷-II進口/國產Interferon alpha 6 干擾α6抗體含量:
重樓皂苷 I進口/國產Rffl/RING finger protein 189 環(huán)指蛋白189抗體含量:含量測定
重樓皂苷Ⅱ進口/國產CERKL 視網(wǎng)膜色變性蛋白26抗體含量:含量測定
重樓皂苷 Ⅵ進口/國產Catalase 過化酶抗體含量:含量測定
重樓皂苷 Ⅶ進口/國產Adenylate kinase 2/AK2 苷酸激酶1抗體含量:含量測定
牛細小病毒PCR檢測試劑盒多少錢產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝,;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒,。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份