詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
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產(chǎn)品名稱:中華枝睪吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒哪里有賣
英文名稱:Clonorchis sinensisPCR
規(guī)格:50T
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫,、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門,。
?PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性,;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞,;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位),;在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌,。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng),。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染,、易推廣,。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板,??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液,、洗嗽液,、毛發(fā)、細(xì)胞,、活PCR技術(shù)概論,。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶,、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增,。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC機(jī)分布,,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),,特別是3'端的互補(bǔ),,否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),,以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn),, 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以最低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì),。
98%20mgTGF-α ELISA Kit
英文名稱:DAB2環(huán)指蛋白8抗體
英文名稱:DACH1RAS蛋白樣激活劑1抗體
英文名稱:DAB2IPRas相關(guān)結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)2抗體
英文名稱:DECR1抑癌基因PDLIM4抗體
英文名稱:DCTN3RAS抑制蛋白1抗體
英文名稱:DCTN6周期素D相關(guān)蛋白抗體
英文名稱:DIO2Rho家族GTP酶3抗體
葉下珠進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)phospho-AMPK beta 1(Ser108) 酸化苷單酸活化蛋白激酶β1抗體含量:TLC法鑒別
華佩蘭進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)phospho-PRKAB1(Ser182) 酸化苷單酸活化蛋白激酶β1抗體含量:TLC法鑒別
東風(fēng)桔進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)AMPK gamma 1 苷酸活化蛋白激酶γ1抗體含量:TLC法鑒別
穿山龍進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)KLHDC5 kelch樣蛋白5抗體含量:TLC法鑒別
云實(shí)皮進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)phospho-C-Myc(Thr358) 酸化致癌因C-Myc抗體含量:TLC法鑒別
藍(lán)布正進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)phospho-C-Myc(Thr373) 酸化致癌因C-Myc抗體含量:TLC法鑒別
楤木進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)KLHL22 Kelch樣蛋白22抗體含量:TLC法鑒別
中華枝睪吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒哪里有賣產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),,無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝,;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒,。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書 1份