產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品名稱：山梨醇含量科研

規(guī)格：48樣 96樣

貨號：AS214

檢測方法：可見分光光度法 微板法

產(chǎn)品分類：碳水化合物代謝系列

貯存溫度：2～8℃,。

本試劑盒保質(zhì)期：6個月。本產(chǎn)品僅用于科研實驗,。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存,；

試劑一：液體 5mL×1 瓶,，4℃保存,；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存,；

試劑三：液體 4mL×1 瓶,，4℃保存,；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存,。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）,、低溫離心機,、移液器、研缽,、冰和蒸餾水

四,、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程,，避免實驗

樣本和試劑浪費,！

1,、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液,，在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器),。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液,。

【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本：

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清,；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W,，超聲 3s，間隔 10s,，重復 30 次）,；

12000rpm 4℃離心 10min，取上清,，置冰上待測,。

【注】：若增加樣本量,，可按照細菌/細胞數(shù)量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測,；若渾濁,，離心后取上清檢測。

FAM129A/Cell growth inhibiting gene 39 protein  細胞生抑制基因39抗體 規(guī)格: 0.2ml

BNP(H1G3)  人腦鈉單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

FRMD4B  FRMD4B抗體 規(guī)格: 0.2ml

PDE4A  磷二酯4A抗體 規(guī)格: 0.1ml

ER β  雌激受體β抗體 規(guī)格: 0.1ml

MMP-9  基質(zhì)金屬-9抗體 規(guī)格: 0.1ml

Hornerin/S100A18  角化S100A16抗體 規(guī)格: 0.2ml

HCCR1/BRI3BP  宮頸原基因1/bri3結合抗體 規(guī)格: 0.2ml

IFNAR1  干擾α受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

C9ORF43  9號染色體開放閱讀框43抗體 規(guī)格: 0.2ml

山梨醇含量科研脂肪肝比色法定量檢測試劑盒  

DMEM培養(yǎng)基  1/10升（劑）

RPMI1640培養(yǎng)基  1/10升（劑）

MEM培養(yǎng)基  1/10升（劑）

M199培養(yǎng)基  1/10升（劑）

GMEM培養(yǎng)基  1/10升（劑）

DMEM/F12培養(yǎng)基  1/10升（劑）

McCOY’S 5A培養(yǎng)基  1/10升（劑）

LEIBOVITZ’S L15培養(yǎng)基  1/10升（劑）

ISCOVE’S MDM培養(yǎng)基  1/10升（劑）

操作步驟:

實驗開始前,，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時,，均需混勻，混勻時盡量避免起泡,。實驗前應預測樣品含量,，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋,，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù),。

1.        加樣：分別設空白孔,、標準孔、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,，余孔分別加標準品或待測樣品100μl,，注意不要有氣泡,，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘,。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液,。

2.        棄去液體,，甩干，不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘,。

3.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板3次,，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘,。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體,，甩干,，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘,，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）,。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,，終止反應，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,，底物反應時間到后應盡快加入終止液,。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測,。