詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。?
產(chǎn)品名稱:乙型肝炎病毒型PCR檢測試劑盒多少錢
英文名稱:Hepatitis B Virus(HBV)APCR
規(guī)格:50T
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸:低溫、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門,。
?PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性,;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞,;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位),;在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌,。
(3) 簡便,、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng),。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無放射性污染,、易推廣,。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板,??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液,、洗嗽液,、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論,。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增,。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),,避免兩條引物間互補(bǔ),,特別是3'端的互補(bǔ),,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn),, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以最低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會,。
鑒別98%20mgplasma kallikrein,KLKB1 ELISA kit
英文名稱:Alpha-ENaC熱休克蛋白75抗體
英文名稱:E2F8腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體
英文名稱:EMAP2四分子交聯(lián)體15抗體(四旋蛋白)
英文名稱:Ecm2腱調(diào)蛋白抗體(軟骨調(diào)節(jié)素樣1蛋白)
英文名稱:EMP3血栓素A2受體抗體
英文名稱:EVC2Toll樣受體11抗體
英文名稱:EPDR1血小板反應(yīng)蛋白抗體
181 霜脲 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:0.1g進(jìn)口/國產(chǎn)GPVI/Glycoprotein VI 糖蛋白VI/六糖蛋白抗體含量:
185 環(huán)氨嗪 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:0.25g進(jìn)口/國產(chǎn)SISP1/GI24 應(yīng)激誘導(dǎo)分泌蛋白1抗體含量:
187 磺 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:1g進(jìn)口/國產(chǎn)MMRN1/ECM 內(nèi)皮細(xì)胞MMRN1蛋白抗體含量:
191 內(nèi)吸 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 0.1g進(jìn)口/國產(chǎn)PAFAH1B2 血小板衍化生長因子β抗體含量:
195 脲 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:0.1g進(jìn)口/國產(chǎn)PAFAH1B3/PAFAHG 血小板衍化生長因子γ抗體含量:
221 野燕枯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:0.25g進(jìn)口/國產(chǎn)Pleckstrin/p47 血小板47蛋白抗體含量:
223 除蟲脲 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:0.25g進(jìn)口/國產(chǎn)SCUBE1 新型血小板相關(guān)血管內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體含量:
乙型肝炎病毒型PCR檢測試劑盒多少錢產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),,無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,,可同時(shí)進(jìn)行多個檢測,;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份