詳細介紹
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)試劑盒(可見顯色法)價格
規(guī)格:48樣 96樣 24樣
貨號:AS294
檢測方法:可見分光光度法 微板法 紫外分光光度法
產(chǎn)品分類:呼吸代謝途徑系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個月,。本產(chǎn)品僅用于科研實驗,。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,,4℃保存,;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑四:粉劑×2 瓶,,4℃保存,。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm),、低溫離心機、移液器,、研缽,、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,,了解本批樣品情況,,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費,!
1,、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器),。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液,。
【注】:若增加樣本量,,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清,;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,,超聲 3s,,間隔 10s,重復 30 次),;
12000rpm 4℃離心 10min,,取上清,置冰上待測,。
【注】:若增加樣本量,,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測,;若渾濁,,離心后取上清檢測。
PLC β1/Phospholipase C beta 1 磷酯Cβ1抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355) 磷化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 規(guī)格: 0.1ml
Cyclin T2 周期T2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Bovine IgG/FITC FITC標記的羊抗牛IgG 規(guī)格: 0.3ml
UBL7 泛樣7抗體 規(guī)格: 0.2mlGTPBP10/Claudin12 緊密連接12抗體 規(guī)格: 0.2ml
YES1 原基因激Yes1抗體 規(guī)格: 0.1ml
CCL17/ABCD2 胸活化調(diào)節(jié)趨化因子抗體 規(guī)格: 0.1mlPI3 Kinase p110 beta 磷脂酰肌激(PI3Kβ)抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-A Raf(Ser299) 磷化A-Raf抗體 規(guī)格: 0.1ml
RNF93/ZNF178 環(huán)指93抗體 規(guī)格: 0.2mlKMT6/EZH2 抑EZH2抗體 規(guī)格: 0.2ml
JMJD2A/KDM4A/JHDM3A 組去甲基化JMJ2A抗體 規(guī)格: 0.2mlAlpha-Synuclein/Syn/SNCA 核突觸α抗體 規(guī)格: 0.1ml
LONP1 線粒體離子肽1抗體 規(guī)格: 0.2mlRelB 轉(zhuǎn)錄因子RelB抗體 規(guī)格: 0.2ml
磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)試劑盒(可見顯色法)價格27208-80-6虎杖;Polydatin 規(guī)格: 20mg
6020-18-4黃連 規(guī)格: 20mg
琥酯 規(guī)格: 100mg
578-74-5芹菜-7-O-β-D-吡喃 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg
2586-96-1蓮心 規(guī)格: 20mg
62499-27-8天;天;4-羥基-beta 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
25161-41-5醋戊曲酯 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
乙酰磷二鋰鹽 規(guī)格: 0.3g/支
477-90-7巖白菜;Bengenin 規(guī)格: 50mg
4773-96-0芒果 規(guī)格: 20mg
操作步驟:
實驗開始前,,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解),;試劑或樣品稀釋時,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡,。實驗前應預測樣品含量,,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設空白孔,、標準孔,、待測樣品孔,??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,,加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,,酶標板加上蓋或覆膜,,37℃反應120分鐘,。為保證實驗結(jié)果有效性,,每次實驗請使用新的標準品溶液,。
2. 棄去液體,甩干,,不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),,酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,洗板3次,,每次浸泡1-2分鐘,,大約400μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘,。
5. 溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,,后3-4孔梯度不明顯,即可終止),。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應,,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結(jié)果的準確性,,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。在加終止液后立即進行檢測,。