詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱:亮氨酸氨基肽酶(LAP)試劑盒價(jià)格
規(guī)格:48樣 96樣
貨號(hào):AS132
檢測(cè)方法:可見分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類:氮代謝系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月,。本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn),。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存,;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,,4℃保存,。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm),、低溫離心機(jī),、移液器、研缽,、冰和蒸餾水
四,、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi),!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),,加入 1mL 提取液,,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,,取上清作為待測(cè)液,。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清,;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,,功率 200W,,超聲 3s,間隔 10s,,重復(fù) 30 次),;
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,,置冰上待測(cè),。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取,。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè),;若渾濁,離心后取上清檢測(cè),。
Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)抗體 規(guī)格: 0.2ml
FXR1 脆性X相關(guān)1抗體 規(guī)格: 0.2mlBASC4 擴(kuò)增序列4抗體 規(guī)格: 0.2ml
KCTD11 鉀通道四聚體結(jié)構(gòu)域11抗體 規(guī)格: 0.2ml
Glypican 6 磷脂?;厶?6抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗豬IgG 規(guī)格: 0.1mlCD83 CD83抗體 規(guī)格: 0.2ml
CD31/PECAM-1 小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rho C RhoC抗體 規(guī)格: 0.1mlBTBD1/HCV NS5A transactivated protein 8 丙肝病毒NS5A反轉(zhuǎn)錄8抗體 規(guī)格: 0.2ml
IFN gamma 干擾-γ抗體 規(guī)格: 0.1ml
CK18 細(xì)胞角18抗體(C端) 規(guī)格: 0.1ml
C16orf61 16號(hào)染色體開放閱讀框61抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-Src(Tyr418) 磷化Src原基因抗體 規(guī)格: 0.1ml
亮氨酸氨基肽酶(LAP)試劑盒價(jià)格91-64-5香 規(guī)格: 20mg
促黃體生成激 規(guī)格: 930mIU/支
64917-83-5五味子酯戊 規(guī)格: HPLC≥97%;20mg
鵝不食草 規(guī)格: 2g
515-03-7香紫蘇 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
70-47-3L-天冬酰胺 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg
生脈提取物 規(guī)格: 10mg
88105-29-7三七皂Fe;toginseng t 規(guī)格: 20mg
303-98-0輔Q10 規(guī)格: 20mg
雞矢藤 規(guī)格: 1g
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解),;試劑或樣品稀釋時(shí),,均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡,。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
2. 棄去液體,甩干,,不用洗滌,。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘,。
3. 溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板3次,,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘,。
5. 溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板5次,,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),,此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,,后3-4孔梯度不明顯,即可終止),。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應(yīng),,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值),。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè),。