詳細介紹
產(chǎn)品名稱:牛支原體PCR檢測試劑盒價格
英文名稱:Mycoplasma bovisPCR
規(guī)格:50T
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。
運輸:低溫,、避光,,快遞免費送貨上門。
?產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝,;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,,可同時進行多個檢測,;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
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PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),;在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便,、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng),。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,,無放射性污染,、易推廣,。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,。可直接用臨床標本如血液,、體腔液,、洗嗽液,、毛發(fā)、細胞,、活PCR技術(shù)概論,。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)*,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
檢查用97%1個Gamma-tubulin complex component 3,TUBGCP3 ELISA kit
英文名稱:Galectin 9胚胎干細胞關(guān)鍵蛋白抗體
英文名稱:GRM2+GRM4生長抑素受體4抗體
英文名稱:GPNMBSmad4抗體
英文名稱:GGT2 light chainSmad7抗體
英文名稱:GGT5 light chainShh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路膜蛋白受體抗體
英文名稱:GGT7 light chain前列腺跨膜上皮1抗原抗體
英文名稱:GNPTAB雌激素調(diào)節(jié)蛋白LIV1/鋅轉(zhuǎn)?益?闃招
牛支原體PCR檢測試劑盒價格Calcium Chloride (AS)進口,、國產(chǎn)10035-04-81g
Calcium Gluceptate進口、國產(chǎn)29039-00-7200mg
Calcium Hydroxide (AS)進口,、國產(chǎn)1305-62-01g
進口、國產(chǎn)ea
Calcium Lactate進口,、國產(chǎn)63690-56-21g
Calcium Lactobionate進口,、國產(chǎn)110638-68-1200mg
Calcium Levulinate (AS)進口,、國產(chǎn)5743-49-71g反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶,、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),,避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,,產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以最低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會,。