詳細介紹
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:游離脂肪酸含量(FFA)試劑盒科研
規(guī)格:24樣 48樣
貨號:AS338
檢測方法:可見分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類:脂肪酸系列
貯存溫度:2~8℃,。
本試劑盒保質(zhì)期:6個月,。本產(chǎn)品僅用于科研實驗。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑二:液體 200μL×1 支,,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存,。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計,、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機,、移液器,、研缽,、冰和蒸餾水
四,、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,,熟悉實驗流程,,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1,、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),,加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器),。4oC×12000rpm 離心 10min,,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,,功率 200W,超聲 3s,,間隔 10s,,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,,取上清,,置冰上待測,。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取,。 ③ 液體樣本:直接檢測,;若渾濁,離心后取上清檢測,。
Phospho-PLC beta3 (Ser537) 磷化磷酯Cβ3抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-dog IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.1ml
C16orf48 16號染色體開放閱讀框48抗體 規(guī)格: 0.2mlFBXL3 FBXL3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgM 羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 1mg
OXSR1 氧化應激反應1抗體 規(guī)格: 0.2ml
PCB 丙酮羧化抗體 規(guī)格: 0.2ml
L-Selectin/CD62L L選擇抗體 規(guī)格: 0.1ml
BOD1 雙向染色體細胞分裂1抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-SYT6(Thr418) 磷化突觸6抗體 規(guī)格: 0.1ml
EPHB4 激受體B4抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Biotin/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-chicken IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.1ml
游離脂肪酸含量(FFA)試劑盒科研羥基酪 規(guī)格: HPLC≥98%,50mg/支;
68-26-8A 規(guī)格: 20mg
吲帕胺 規(guī)格:
腐胺 ;1,4-Diamibuta 規(guī)格: 20mg
13241-33-3新橙皮 規(guī)格: HPLC≥98%,;20mg/vial
細菌內(nèi)檢查用(盒) 規(guī)格: 5ml,10支/盒
60-82-2根皮 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
17019-92-011-基乳香 規(guī)格: 20mg
989-51-5表沒食子兒茶沒食子酯 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
56-45-1L- 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg
操作步驟:
實驗開始前,,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解),;試劑或樣品稀釋時,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡,。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,,應對樣品進行稀釋,,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù),。
1. 加樣:分別設空白孔,、標準孔、待測樣品孔,??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘,。為保證實驗結果有效性,,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,,甩干,,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),,酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘,。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板3次,,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘,。
5. 溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板5次,,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,,后3-4孔梯度不明顯,即可終止),。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結果的準確性,,底物反應時間到后應盡快加入終止液,。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測,。