試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶,，4℃保存,；

試劑一：液體 5mL×1 瓶,，4℃保存,；

試劑二：液體 200μL×1 支,，4℃保存,；

試劑三：液體 4mL×1 瓶,，4℃保存,；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存,。

產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品名稱：硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)試劑盒科研

規(guī)格：48樣 96樣

貨號：AS058

檢測方法：可見分光光度法 微板法

產(chǎn)品分類：ASA-GSH循環(huán)系列

貯存溫度：2～8℃,。

本試劑盒保質(zhì)期：6個月。本產(chǎn)品僅用于科研實驗,。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計,、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機,、移液器,、研缽、冰和蒸餾水

四,、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程,，避免實驗

樣本和試劑浪費,！

1、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g）,，加入 1mL 提取液,，在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,，取上清作為待測液,。

【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本：

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清,；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W,，超聲 3s,，間隔 10s，重復 30 次）,；

12000rpm 4℃離心 10min,，取上清，置冰上待測,。

【注】：若增加樣本量,，可按照細菌/細胞數(shù)量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測,；若渾濁,，離心后取上清檢測。

EDG2/LPA1  溶磷脂受體1抗體 規(guī)格: 0.1ml

TGM3  轉(zhuǎn)3抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-human IgM/RBITC  羅丹明標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-Tuberin/TSC2(Ser1798)  磷化結(jié)節(jié)性硬化抗體 規(guī)格: 0.1mlPPAR gamma  過氧化活化增生受體γ抗體 規(guī)格: 0.2ml

CHL1/CALL  神經(jīng)細胞粘附分子CALL抗體 規(guī)格: 0.2ml

SynCAM/TSLC1  肺瘤阻抑基因1抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-CDC27/ANAPC3(Thr244)  磷化后期促進復合3抗體 規(guī)格: 0.1ml

CXCR3/CD183  細胞表面趨化因子受體3抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-SHC (Tyr427)  磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化1抗體 規(guī)格: 0.1ml

CD133 antigen  造干細胞抗原CD133抗體 規(guī)格: 0.1mlDDX43/CT13  瘤/睪抗原13抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-B-Raf (Ser602)  磷化B-Raf抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-mouse IgG-Fc/FITC  FITC標記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.1ml

ARL3  ADP核糖基化樣因子ARL3抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-cdc25A (Ser292)  磷化細胞分裂周期25抗體 規(guī)格: 0.1ml

硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)試劑盒科研20977-05-3七葉皂鈉 規(guī)格： HPLC≥98%,，20mg/vial

乙氧柳胺 規(guī)格： 100mg

200619-13-2DRF-1042 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

88206-46-6羌活 規(guī)格： 20mg

496-63-9焦袂康 規(guī)格： 20mg

78-70-6芳樟 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

格列美脲雜質(zhì)1 （4-[2-(3-乙基- 規(guī)格： 50mg

485-19-8瑞枯靈;Reticuline 規(guī)格： 20mg

121-33-5香蘭 規(guī)格： 20mg

63-74-1磺胺 規(guī)格： 1000mg

操作步驟:

實驗開始前,，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時,，均需混勻,，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,，如樣品濃度過高時,，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù),。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,，余孔分別加標準品或待測樣品100μl,，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,，酶標板加上蓋或覆膜,，37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,，每次實驗請使用新的標準品溶液,。

2.        棄去液體,，甩干，不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制）,，酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板3次,，每次浸泡1-2分鐘,，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl,，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘,，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,，后3-4孔梯度不明顯,，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,，終止反應,，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結(jié)果的準確性,，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）,。在加終止液后立即進行檢測,。