詳細(xì)介紹
操作步驟:
實驗開始前,,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,,如樣品濃度過高時,,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,,37℃反應(yīng)120分鐘,。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
2. 棄去液體,,甩干,不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),,酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,洗板3次,,每次浸泡1-2分鐘,,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),,此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,,即可終止),。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),,此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液,。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測,。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:乙二醛酶Ⅱ(Gly II)活性測定試劑盒價格
規(guī)格:48樣 96樣
貨號:AS042
檢測方法:紫外分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類:氧化應(yīng)激系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個月,。本產(chǎn)品僅用于科研實驗,。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,,4℃保存,;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑四:粉劑×2 瓶,,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計,、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm),、低溫離心機、移液器,、研缽,、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,,熟悉實驗流程,,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1,、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),,加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器),。4oC×12000rpm 離心 10min,,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,,功率 200W,超聲 3s,,間隔 10s,,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,,取上清,,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取,。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,,離心后取上清檢測,。
C19orf18 19號染色體開放閱讀框18抗體 規(guī)格: 0.2mlPP2Ac/PP4C 磷酯-2Ac抗體 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG 驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 1mg
EGFL7 類表皮生因子域7抗體 規(guī)格: 0.1mlTransthyretin 轉(zhuǎn)甲狀抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/AP 性磷(AP)標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格: 0.1ml
OSTM1 骨硬化病相關(guān)跨膜1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Netrin G1 ligand 軸突生誘向因子G1配體抗體 規(guī)格: 0.2ml
CDK14/PFTK1 周期依賴性激14抗體 規(guī)格: 0.2mlSATB1 核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合1抗體 規(guī)格: 0.1ml
UBAP1 泛相關(guān)1抗體(鼻咽相關(guān)基因20) 規(guī)格: 0.2ml
APP/ABPP 淀粉樣肽前體抗體 規(guī)格: 0.1ml
B7H4 B7-H4抗體 規(guī)格: 0.1ml
GRAMD3/NS3TP2 丙型肝炎病毒-NS3反轉(zhuǎn)錄激活2抗體 規(guī)格: 0.2ml
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