試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存,；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存,；

試劑二：液體 200μL×1 支,，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶,，4℃保存,；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存,。

產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品名稱：尿酸(UA)含量試劑盒(尿酸酶比色法)說明書

規(guī)格：48樣 96樣

貨號：AS382

檢測方法：可見分光光度法 微板法

產(chǎn)品分類：醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)代謝指標(biāo)

貯存溫度：2～8℃,。

本試劑盒保質(zhì)期：6個月。本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn),。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì),、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī),、移液器,、研缽、冰和蒸餾水

四,、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況,，熟悉實(shí)驗(yàn)流程,，避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)！

1,、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g）,，加入 1mL 提取液,，在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,，取上清作為待測液,。

【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取

② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本：

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清,；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴,，功率 200W,，超聲 3s，間隔 10s,，重復(fù) 30 次）,；

12000rpm 4℃離心 10min，取上清,，置冰上待測,。

【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取,。 ③ 液體樣本：直接檢測,；若渾濁，離心后取上清檢測,。

細(xì)胞一氧化氮合成酶總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒  20次

組織一氧化氮合成酶總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒  20次

血液一氧化氮合成酶總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒  20次

尿液一氧化氮合成酶總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒  20次

一氧化氮合成酶（NOS）總活性終點(diǎn)比色法定量檢測試劑盒  50/100次

細(xì)胞乳酸脫氫酶（LDH）總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒  20次

組織乳酸脫氫酶（LDH）總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒  20次

血液乳酸脫氫酶（LDH）總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒  20次

細(xì)乳酸脫氫酶（LDH）總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒  20次

尿酸(UA)含量試劑盒(尿酸酶比色法)說明書531-44-2東莨菪;Scopolin 規(guī)格： 20mg

199796-52-6DHA-paclitaxel 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

132-86-51,3-萘二 規(guī)格： 50mg

58-96-8尿 規(guī)格： HPLC≥98%;50mg

粉萆薢對照藥材 規(guī)格： 1g

58543-16-1萊苞迪甙A;萊苞迪A 規(guī)格： HPLC≥98%,10mg/支

11088-09-8次 規(guī)格： 10mg

甲酰新原 規(guī)格： 20mg

535-75-1六氫羧;DL-Pipecolini 規(guī)格： 20mg

522-12-3槲皮 規(guī)格： 20mg

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前,，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時,，均需混勻,，混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,，如樣品濃度過高時,，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,，計(jì)算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘,。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,，甩干,，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制）,，酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘,。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體,，甩干,，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘,，大約400μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl,，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘,。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體,，甩干,，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘,，350μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi),，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯,，即可終止）,。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng),，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液,。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測,。