詳細(xì)介紹
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑二:液體 200μL×1 支,,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存,。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:土壤β-半乳糖苷酶(S-β-GAL)試劑盒科研
規(guī)格:24樣 48樣
貨號:AS110
檢測方法:可見分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類:土壤系列
貯存溫度:2~8℃,。
本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月。本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn),。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì),、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm),、低溫離心機(jī),、移液器、研缽,、冰和蒸餾水
四,、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1,、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),,加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器),。4oC×12000rpm 離心 10min,,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清,;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,,功率 200W,,超聲 3s,間隔 10s,,重復(fù) 30 次),;
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,,置冰上待測,。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取,。 ③ 液體樣本:直接檢測,;若渾濁,離心后取上清檢測,。
PRKCDBP 激C delta結(jié)合抗體 規(guī)格: 0.2ml
hnRNP U 異質(zhì)核糖核U抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-human IgM/Bio 標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.3ml
GOLPH2/GP73 高爾基體膜GP73抗體 規(guī)格: 0.2ml
DLL4/Delta 4 Notch信號通路Delta樣配體4抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-Cdc25B (Ser323) 磷化細(xì)胞分裂周期25B抗體 規(guī)格: 0.1ml
Ubiquitin/UBC/UB 泛抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Chicken IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的羊抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml
TAG1/CNTN2 瞬時(shí)表達(dá)軸索糖1抗體 規(guī)格: 0.1mlCXCR5/CD185 細(xì)胞表面趨化因子受體5抗體 規(guī)格: 0.1ml
C11ORF67/PTD015 11號染色體開放閱讀框67抗體 規(guī)格: 0.2ml
HOXc8 HOXc8抗體 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-human IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1mlHBV pre S1/S2 protein 人乙肝病毒pre S1/S2抗體 規(guī)格: 0.1ml
土壤β-半乳糖苷酶(S-β-GAL)試劑盒科研29388-59-8開環(huán)異落葉松樹脂;Secoisolar 規(guī)格: 20mg
10236-47-2川陳皮 規(guī)格: 20mg
50-34-0溴肽林 規(guī)格: 50mg
541-15-1L-;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 規(guī)格: 0.1g
1852-94-2馬錢;Loganin 規(guī)格: 20mg
77-95-2D-(-)-奎寧;右旋奎寧;D-(- 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
馬兜鈴內(nèi)酰胺A 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
苦杏仁 規(guī)格: 2.5g
94238-00-3紅花I;CrocinⅠ 規(guī)格: 20mg
138-52-3楊 規(guī)格: 20mg
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),,均需混勻,,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,,如樣品濃度過高時(shí),,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,,37℃反應(yīng)120分鐘,。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,,甩干,,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),,酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘,。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,,大約400μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘,。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),,此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,,即可終止),。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。在加終止液后立即進(jìn)行檢測,。