產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品名稱：α-酮戊二酸(α-KG)含量試劑盒(可見顯色法)價格

規(guī)格：24樣 48樣

貨號：AS274

檢測方法：可見分光光度法 微板法

產(chǎn)品分類：呼吸代謝途徑系列

貯存溫度：2～8℃,。

本試劑盒保質(zhì)期：6個月。本產(chǎn)品僅用于科研實驗,。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存,；

試劑一：液體 5mL×1 瓶,，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支,，4℃保存,；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存,；

試劑四：粉劑×2 瓶,，4℃保存。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計,、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）,、低溫離心機、移液器,、研缽,、冰和蒸餾水

四,、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況,，熟悉實驗流程,，避免實驗

樣本和試劑浪費！

1,、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g）,，加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器),。4oC×12000rpm 離心 10min,，取上清作為待測液。

【注】：若增加樣本量,，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本：

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴,，功率 200W，超聲 3s,，間隔 10s,，重復 30 次）；

12000rpm 4℃離心 10min,，取上清,，置冰上待測。

【注】：若增加樣本量,，可按照細菌/細胞數(shù)量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取,。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁,，離心后取上清檢測,。

CXCR2/CD182  細胞表面趨化因子受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-NMDAR2B (Tyr1070)  磷化谷氨受體2B抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml

CaIPLA2/PLA2G6  胞漿鈣獨立磷脂A2抗體 規(guī)格: 0.1ml

PCDHGA8  原鈣粘γA8抗體 規(guī)格: 0.2ml

Slc22a5  溶質(zhì)載體家族22成員5抗體 規(guī)格: 0.2ml

CHMP4B/CHMP4C  染色質(zhì)修飾4B(4C)抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-FOXO4 (Ser197)  磷化叉4抗體 規(guī)格: 0.1ml

Integrin β1/CD29  整合β1抗體 規(guī)格: 0.1ml

APIP/Apaf1 Interacting Protein  凋亡活性因子1相互作用抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Bio  標記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlDOK3  對接3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Cyclin B1  周期B1抗體 規(guī)格: 0.1mlMaspin  抑基因抗體 規(guī)格: 0.1ml

α-酮戊二酸(α-KG)含量試劑盒(可見顯色法)價格125317-39-7酒石長春瑞濱;VirelbineT 規(guī)格： 20mg

481-53-8橘皮 規(guī)格： 20mg

2673-40-7派利文;Perivine 規(guī)格： 20mg

73692-50-9柚皮查爾 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

6468-55-9異去甲蟛蜞菊內(nèi)酯 規(guī)格： 20mg

77-52-1熊果 規(guī)格： 20mg

56-89-3L- 規(guī)格： HPLC≥99%;200mg

42864-78-8貝凡洛爾 規(guī)格： 100mg

518-17-2吳茱萸;Evodiamine 規(guī)格： 20mg

32791-84-7人參三 規(guī)格： 20mg

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）,；試劑或樣品稀釋時,，均需混勻，混勻時盡量避免起泡,。實驗前應預測樣品含量,，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋,，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔,、待測樣品孔,?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡,，加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,，酶標板加上蓋或覆膜,，37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,，每次實驗請使用新的標準品溶液,。

2.        棄去液體，甩干,，不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘,。

3.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板3次,，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘,。

5.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi),，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）,。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,，終止反應,，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結(jié)果的準確性,，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）,。在加終止液后立即進行檢測,。