詳細介紹
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:Fd-谷氨酸合成酶(Fd-GOGAT)試劑盒-綠色組織科研
規(guī)格:24樣 48樣
貨號:AS114
檢測方法:可見分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類:氮代謝系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個月,。本產(chǎn)品僅用于科研實驗,。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑二:液體 200μL×1 支,,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存,。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計,、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機,、移液器,、研缽、冰和蒸餾水
四,、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,,避免實驗
樣本和試劑浪費,!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),,加入 1mL 提取液,,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,,取上清作為待測液,。
【注】:若增加樣本量,,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清,;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,,超聲 3s,,間隔 10s,重復(fù) 30 次),;
12000rpm 4℃離心 10min,,取上清,置冰上待測,。
【注】:若增加樣本量,,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測,;若渾濁,,離心后取上清檢測。
體液還原型肽(GSH)濃度比色法定量檢測試劑盒 50次
植物還原型肽(GSH)濃度比色法定量檢測試劑盒 50次
細胞氧化型肽(GSSG)濃度比色法定量檢測試劑盒 50次
血液氧化型肽(GSSG)濃度比色法定量檢測試劑盒 50次
組織氧化型肽(GSSG)濃度比色法定量檢測試劑盒 50次
體液氧化型肽(GSSG)濃度比色法定量檢測試劑盒 50次
植物氧化型肽(GSSG)濃度比色法定量檢測試劑盒 50次
細胞肽(GLUTATHIONE)總濃度熒光定量檢測試劑盒 50次
血液肽(GLUTATHIONE)總濃度熒光定量檢測試劑盒 50次
Fd-谷氨酸合成酶(Fd-GOGAT)試劑盒-綠色組織科研124-76-5異 規(guī)格: 20mg
133-05-1細辛脂 規(guī)格: 20mg
2292-16-2甲基蓮心 規(guī)格: 20mg
鴉膽子 規(guī)格: 1g
131341-86-1咯菌;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.1g
毛萼結(jié)甲(95%) 規(guī)格: 20mg
川烏 規(guī)格: 0.5g
71-30-7胞 規(guī)格: HPLC≥98%;50mg
147-85-3L- 規(guī)格: 20mg
乙肝表面(HBs)抗體免疫球 規(guī)格: 2.5IU/支,,0.5ml/支
操作步驟:
實驗開始前,,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,,如樣品濃度過高時,,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,,37℃反應(yīng)120分鐘,。為保證實驗結(jié)果有效性,,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,,甩干,,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),,酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘,。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板3次,,每次浸泡1-2分鐘,,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,洗板5次,,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,,后3-4孔梯度不明顯,,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應(yīng),,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結(jié)果的準確性,,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。在加終止液后立即進行檢測,。