詳細介紹
操作步驟:
實驗開始前,,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解),;試劑或樣品稀釋時,,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,,如樣品濃度過高時,,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù),。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,,37℃反應120分鐘,。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液,。
2. 棄去液體,,甩干,不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),,酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,,棄去孔內液體,,甩干,洗板3次,,每次浸泡1-2分鐘,,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干),。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,,棄去孔內液體,,甩干,,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,,后3-4孔梯度不明顯,,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應,,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結果的準確性,,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。在加終止液后立即進行檢測,。
產品簡介:
產品名稱:半乳糖(D-Galactose)含量試劑盒(紫外法)科研
規(guī)格:24樣 48樣
貨號:AS166
檢測方法:紫外分光光度法 微板法
產品分類:碳水化合物代謝系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質期:6個月,。本產品僅用于科研實驗,。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,,4℃保存,;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑四:粉劑×2 瓶,,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計,、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm),、低溫離心機、移液器,、研缽,、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,,了解本批樣品情況,,熟悉實驗流程,,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1,、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),,加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器),。4oC×12000rpm 離心 10min,,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內,,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,,功率 200W,超聲 3s,,間隔 10s,,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,,取上清,,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取,。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,,離心后取上清檢測,。
ACHE/Acetylcholinesterase 乙酰抗體 0.1ml
E2F8 轉錄因子E2F8抗體 規(guī)格: 0.2mlTHOC2 轉錄因子THOC2抗體 0.2ml
DPY19L4 DPY19L4抗體 規(guī)格: 0.2ml
SKALP/Elafin 彈性抑制劑抗體 規(guī)格: 0.2ml
Dog IgM/Bio 標記的兔抗犬IgM抗體 規(guī)格: 0.1ml
Ephrin A3/EFNA3 激A3受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
Filamin A/FLNA 細絲A抗體 規(guī)格: 0.2ml
RMND1 減數(shù)分裂同源1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Biotin/AP 性磷(AP)標記的兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.1ml
FECH/Ferrochelatase 鐵螯合抗體 規(guī)格: 0.2ml
EFR3A EFR3A抗體 規(guī)格: 0.2ml
半乳糖(D-Galactose)含量試劑盒(紫外法)科研65-19-0育亨賓;Yohimbine hydr 規(guī)格: 20mg
480-41-1柚皮 規(guī)格: 20mg
厄 規(guī)格: 50mg
3馬錢;Brucine 規(guī)格: 20mg
110623-73-9朝藿定B 規(guī)格: 20mg
84-26-4吳茱萸次 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
35575-96-3甲基磷;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.1g
14534-61-33,4-二啡??鼘?規(guī)格: HPLC≥98%,,20mg/vial
胡黃連 規(guī)格: 0.5g
55399-93-4羥基異亮氨 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg