詳細介紹
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,,4℃保存,。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:6-磷酸葡萄糖(G6P)含量試劑盒(酶法)科研
規(guī)格:48樣 96樣
貨號:AS276
檢測方法:可見分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類:呼吸代謝途徑系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個月,。本產(chǎn)品僅用于科研實驗,。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm),、低溫離心機,、移液器、研缽,、冰和蒸餾水
四,、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,,熟悉實驗流程,,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),,加入 1mL 提取液,,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,,取上清作為待測液,。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清,;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,,功率 200W,,超聲 3s,間隔 10s,,重復 30 次),;
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,,置冰上待測,。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取,。 ③ 液體樣本:直接檢測,;若渾濁,離心后取上清檢測,。
RNF169 環(huán)指169抗體 規(guī)格: 0.2ml
TRIM31 環(huán)指HCG1抗體 規(guī)格: 0.2ml
APG4B/AUTL1 自噬相關(guān)4B抗體 規(guī)格: 0.2mlTUSC3 前列抑3抗體 規(guī)格: 0.2ml
GOT2 谷草轉(zhuǎn)氨2抗體 規(guī)格: 0.1ml
ILT2/CD85j 細胞表面免疫球樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM 兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 1mg
DRK1/Kv2.1 鉀通道DRK1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Thymosin Alpha-1/PTMA 胸肽α1抗體 規(guī)格: 0.1mlCripto 1 monoclonal (CT) 畸胎瘤衍化生因子單克隆抗體(C端) 規(guī)格: 0.1ml
CDK5RAP2 CDK5激活結(jié)合2抗體 規(guī)格: 0.2mlRibonuclease 6 核糖核6抗體 規(guī)格: 0.2ml
SHFM3 SHFM3抗體 規(guī)格: 0.2mlKCNG4/KV6.3 鉀離子通道G4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Defensin alpha 4 防御α4抗體 規(guī)格: 0.1ml
6-磷酸葡萄糖(G6P)含量試劑盒(酶法)科研1603-47-08-羥基佛手內(nèi)酯 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
104-55-2桂醛 規(guī)格: 20mg
30636-90-9原人參二 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
103-90-2對乙酰氨基 規(guī)格: HPLC≥99%;100mg
35790-95-5α-常春藤皂 規(guī)格: 20mg
1108-68-5華蟾它靈;Cibufotalin 規(guī)格: 20mg
590-46-5甜菜 規(guī)格: 20mg
石斛 規(guī)格: 約0.4mg/支
19121-58-5澳洲茄;Solasonine 規(guī)格: 20mg
860-79-7環(huán)維黃楊星 D 規(guī)格: ≥99%,,20mg/vial
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解),;試劑或樣品稀釋時,,均需混勻,混勻時盡量避免起泡,。實驗前應預測樣品含量,,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標準孔,、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,,37℃反應120分鐘,。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液,。
2. 棄去液體,,甩干,不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘,。
3. 溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板3次,,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘,。
5. 溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板5次,,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,,后3-4孔梯度不明顯,即可終止),。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結(jié)果的準確性,,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。在加終止液后立即進行檢測,。