詳細介紹
操作步驟:
實驗開始前,,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解),;試劑或樣品稀釋時,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡,。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,,應對樣品進行稀釋,,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數,。
1. 加樣:分別設空白孔,、標準孔、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,,37℃反應120分鐘,。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液,。
2. 棄去液體,,甩干,不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),,酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,,棄去孔內液體,,甩干,,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,,大約400μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘,。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,,甩干,,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,,即可終止),。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,,此時藍色立轉黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,,底物反應時間到后應盡快加入終止液,。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測,。
產品簡介:
產品名稱:谷氨酰胺(Gln)含量試劑盒科研
規(guī)格:24樣 48樣
貨號:AS118
檢測方法:可見分光光度法 微板法
產品分類:氮代謝系列
貯存溫度:2~8℃,。
本試劑盒保質期:6個月。本產品僅用于科研實驗,。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存,;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,,4℃保存,。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計,、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機,、移液器,、研缽、冰和蒸餾水
四,、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,,避免實驗
樣本和試劑浪費,!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),,加入 1mL 提取液,,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,,取上清作為待測液,。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內,,離心后棄上清,;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,,功率 200W,,超聲 3s,間隔 10s,,重復 30 次),;
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,,可按照細菌/細胞數量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取,。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,,離心后取上清檢測,。
組織GRK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
細胞SPHK激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
組織SPHK激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
細胞SPHK1激酶活性比色法定量檢測試劑盒(510) 20次
組織SPHK1激酶活性比色法定量檢測試劑盒(510) 20次
細胞SPHK2激酶活性比色法定量檢測試劑盒(510) 20次
組織SPHK2激酶活性比色法定量檢測試劑盒(510) 20次
細胞SPHK激酶總活性比色法定量檢測試劑盒(510) 20次
組織SPHK激酶總活性比色法定量檢測試劑盒(510) 20次
谷氨酰胺(Gln)含量試劑盒科研77-60-1劍皂元 規(guī)格: 20mg
71320-77-9貝胺 規(guī)格: 50mg
480-36-4蒙花 規(guī)格: 20mg
487-41-2連翹 規(guī)格: 20mg
83-44-3去氧膽 規(guī)格: 100mg
338-69-2丙氨 規(guī)格: HPLC≥98%;100mg
69-89-6黃 規(guī)格: 20mg
卡 規(guī)格: 30mg
552-58-9圣草 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
大豆油 規(guī)格: 50mg