詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:檸檬酸合酶(CS)試劑盒價(jià)格
規(guī)格:24樣 48樣
貨號(hào):AS302
檢測方法:可見分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類:呼吸代謝途徑系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月,。本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn),。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存,。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì),、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī),、移液器,、研缽、冰和蒸餾水
四,、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi),!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),,加入 1mL 提取液,,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器),。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液,。
【注】:若增加樣本量,,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清,;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,,超聲 3s,,間隔 10s,重復(fù) 30 次),;
12000rpm 4℃離心 10min,,取上清,置冰上待測,。
【注】:若增加樣本量,,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測,;若渾濁,,離心后取上清檢測。
苯脫氨酶 英文名稱:Phenylalanine Deaminase Medium 產(chǎn)品規(guī)格:1ml*20
伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB) 英文名稱:Eosin-Methylene Blue Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒 英文名稱:Kovacs's indole Box 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*2
甲基紅指示劑盒 英文名稱:Methyl Red Indicator Box 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*2
哥倫比亞MUG培養(yǎng)基 英文名稱:Columbia- MUG Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
BDS培養(yǎng)基 英文名稱:BDS Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
葡萄糖瓊脂 英文名稱:Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
Andrade氏糖類肉湯 英文名稱:Andrade’s Carbohydrate Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g
Korser氏枸椽酸鹽肉湯 英文名稱:Korser Citrate Sodium Broth 產(chǎn)品規(guī)格:100g
Endo培養(yǎng)基 英文名稱:Endo Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
檸檬酸合酶(CS)試劑盒價(jià)格22139-77-1赤松;Pisylvin 規(guī)格: 20mg
5041-81-6異甘草; Isoliquiritin 規(guī)格: 20mg
509-18-2硬飛燕草 規(guī)格: 20mg
一磷腺鈉 規(guī)格: 20mg/支
568-73-0丹參Ⅰ;Tanshine I 規(guī)格: 20mg
82854-37-3松果菊 規(guī)格: HPLC≥98%,,20mg/vial
麥芽三糖 規(guī)格: 100mg
27975-19-5異甜菊 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
18642-23-4補(bǔ)骨脂定 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
2415-24-9梓 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),,均需混勻,,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,,如樣品濃度過高時(shí),,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘,。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,,甩干,,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),,酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘,。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,,大約400μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘,。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,,后3-4孔梯度不明顯,,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應(yīng),,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。在加終止液后立即進(jìn)行檢測,。