詳細介紹
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:3-磷酸甘油酸激酶(PGK)活性測定試劑盒價格
規(guī)格:48樣 96樣
貨號:AS332
檢測方法:紫外分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類:呼吸代謝途徑系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個月,。本產(chǎn)品僅用于科研實驗,。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,,4℃保存,;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑四:粉劑×2 瓶,,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm),、低溫離心機、移液器,、研缽,、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,,了解本批樣品情況,,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費,!
1,、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器),。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液,。
【注】:若增加樣本量,,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清,;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,,超聲 3s,,間隔 10s,重復 30 次),;
12000rpm 4℃離心 10min,,取上清,置冰上待測,。
【注】:若增加樣本量,,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測,;若渾濁,,離心后取上清檢測。
YEP培養(yǎng)基 英文名稱:YEP Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
硫酸鹽還原菌專屬培養(yǎng)基(postgate培養(yǎng)基) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g
無機磷培養(yǎng)基(不含瓊脂)(測磷細菌解磷效能) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g
克氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g
疊氮鈉-七葉苷瓊脂 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g
C.L.E.D培養(yǎng)基添加劑 英文名稱:C.L.E.D Medium Supplement 產(chǎn)品規(guī)格:1ml*5支
Iron瓊脂 英文名稱:Iron Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
STAA培養(yǎng)基 英文名稱:STAA Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
發(fā)光菌培養(yǎng)基 英文名稱:photobacterium Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
產(chǎn)組胺菌培養(yǎng)基 英文名稱:Histamine producing bacteria Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
3-磷酸甘油酸激酶(PGK)活性測定試劑盒價格60628-96-8芐唑 規(guī)格: 50mg
1702-17-6二;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.1g
19121-58-5澳洲茄 規(guī)格: HPLC≥98%,;20mg/vial
76296-75-8重樓皂 Ⅵ 規(guī)格: 20mg
19906-72-0蜂斗菜內(nèi)酯A 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
82517-12-25-甲基-7-甲氧基異黃 規(guī)格: 20mg
38736-77-5表白樺脂 規(guī)格: 20mg
4431-01-0蒿本內(nèi)酯 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
乙酯 規(guī)格: 1ml
491-50-9槲皮-7-O-;Quercet 規(guī)格: 10mg
操作步驟:
實驗開始前,,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,,如樣品濃度過高時,,應對樣品進行稀釋,,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù),。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標準孔、待測樣品孔,??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘,。為保證實驗結(jié)果有效性,,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,,甩干,,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),,酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘,。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,,大約400μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘,。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,,后3-4孔梯度不明顯,即可終止),。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,,底物反應時間到后應盡快加入終止液,。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測,。