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病毒性神經壞死病病毒RT-PCR試劑盒說明書
閱讀：634 發(fā)布時間：2021-8-20| 提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 46.5KB |
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| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數 | 634次 |
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病毒性神經壞死病病毒RT-PCR試劑盒說明書
1,、試劑盒簡介貨為了適應病毒性神經壞死病病毒RT-PCR試劑盒快速檢測和疫病研究的需要,，本公司參照 OIE 國際標準中規(guī)定的引物序列,，經多次實驗及系統(tǒng)優(yōu)化，開發(fā)了本試劑盒。應用本試劑盒進行檢測具有快速,、靈敏,、特異、準確,、安全操作簡單,、應用廣泛和高通量檢測等特點及優(yōu)點。
2,、試劑盒組成:
試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴增試劑,，具體組成參見表 1：s
表 1：試劑盒組成（50test/盒）
試劑盒組成及試劑配制：
1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）,。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶,。
6. 生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶,。
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）,。
樣本處理及要求：
1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測,，或將標本放于-20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑,，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融,。
3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整,，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融,。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,，取上清檢測。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或將標本放于-20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融。
操作流程:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加。
4.除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6.每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL，15min內,，在450nm波長處測定各孔的OD值,。
樣本：血清 血漿 組織勻漿等液體樣本
標記物：血清 血漿 組織勻漿等
應用：僅用科研實驗檢測定量，定性檢
檢測方法：夾心法
技術要求：全程按說明書步驟檢測,，操作規(guī)范,，專業(yè)，儀器設備齊全,。
規(guī)格：48t/96t
性狀：液體
運輸方式：快遞發(fā)貨
有效期：6個月品
特點：靈敏性高,，---性，吸附均勻,，吸附性好,，回收利用率高，是一款可以讓您放心選購的產品,。
使用范圍：此產品供科研實驗使用,，不得用于---。
用途：用于測定人血清、血漿,、組織及相關液體樣本中的含量或活性,。
注意事項:
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存,。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果,。
2.各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性,，以避免試驗誤差,。一次加樣時間最好控制在5分鐘內，如標本數量多,，推薦使用排槍加樣,。
3.請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔,。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定,，計算時請最后乘以總稀釋倍數（×n×5）,。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
5.底物請避光保存,。
6.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
7.所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
9.不能使用過期產品,。
10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準。
每個樣品測試反應體系配制見下表 2,。
表 2 每個樣品測試反應體系配制表
注：本公司提供試劑盒免費代測服務,。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。