化工儀器網(wǎng)
資料下載
禽白血病病毒通用RT-PCR試劑盒說明書
閱讀：652 發(fā)布時間：2021-7-16| 提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 28.9KB |
|---|---|---|---|
| 資料圖片 | 下載次數(shù) | 135次 | |
| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 652次 |
| 免費下載 | 點擊下載 |
禽白血病病毒通用探針法熒光定量RT-PCR試劑盒說明書
試劑盒簡介貨為了適應(yīng)禽白血病病毒通用探針法熒光定量RT-PCR試劑盒快速檢測和疫病研究的需要,，本公司參照 OIE 國際標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的引物序列，經(jīng)多次實驗及系統(tǒng)優(yōu)化,，開發(fā)了本試劑盒,。應(yīng)用本試劑盒進(jìn)行檢測具有快速、靈敏,、特異,、準(zhǔn)確、安全操作簡單,、應(yīng)用廣泛和高通量檢測等特點及優(yōu)點,。
試劑盒組成及試劑配制：
1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）,。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶,。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶,。
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶,，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）,。
樣本處理及要求：
1.血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果）,，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,，具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中,，于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,，或反復(fù)凍融,。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測,。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加。
4.除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6.每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值,。
樣本：血清 血漿 組織勻漿等液體樣本
標(biāo)記物：血清 血漿 組織勻漿等
應(yīng)用：僅用科研實驗檢測定量，定性檢
檢測方法：夾心法
技術(shù)要求：全程按說明書步驟檢測,，操作規(guī)范,，專業(yè)，儀器設(shè)備齊全,。
規(guī)格：48t/96t
性狀：液體
運(yùn)輸方式：快遞發(fā)貨
有效期：6個月品
特點：靈敏性高,，---性,，吸附均勻，吸附性好,，回收利用率高,，是一款可以讓您放心選購的產(chǎn)品。
使用范圍：此產(chǎn)品供科研實驗使用,，不得用于---,。
用途：用于測定人血清、血漿,、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性,。
注意事項:
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果,。
2． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,，以避免試驗誤差,。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣,。
3． 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
4． 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。
5． 底物請避光保存,。
6． 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)
7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
8.本試劑不同批號組分不得混用,。
9.不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準(zhǔn),。
注：本公司提供試劑盒免費代測服務(wù)。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。