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酶聯(lián)免疫試劑盒操作說明
閱讀:838 發(fā)布時間:2019-7-24酶聯(lián)免疫試劑盒操作說明
酶聯(lián)免疫試劑盒是酶免疫測定技術中應用廣的技術,。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應板 ) 表面,,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除,。小編介紹 酶聯(lián)免疫試劑盒操作說明,。
標本的采集及保存:
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,,或將標本放于-20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融,。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000 g離心15分鐘,,或將標本放于-20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,,取上清即可檢測,,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融,。
樣本處理及要求:
1,、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。
仔細收集上清,,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心,。
2,、血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,,應該再次離心,。
3、尿液:用無菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心,。胸腹水、腦脊液參照實行,。
4,、細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,,以使細胞破壞并放出細胞內成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心,。
5、組織標本:切割標本后,,稱取重量,。加入一定量的PBS,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用,。
6,、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融.
7,、不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。