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鼠內(nèi)毒素(endotoxin)酶聯(lián)免疫試劑盒樣本處理及要求

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鼠內(nèi)毒素(endotoxin)酶聯(lián)免疫試劑盒樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心,。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)該再次離心,。

3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照實(shí)行,。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,,稱取重量,。加入一定量的PBS,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?/span>用,。標(biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),,其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7.  不能檢測(cè)含 NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。
 

鼠內(nèi)毒素(endotoxin)酶聯(lián)免疫試劑盒組成:

試劑盒組成 48 孔配置 96 孔配置 保存

說(shuō)明書(shū) 1 份 1 份

封板膜 2 片(48) 2 片(96)

密封袋 1 個(gè) 1 個(gè)

酶標(biāo)包被板 1×48 1×96 2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品:0.9Eu/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存

酶標(biāo)試劑 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存

樣品稀釋液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存

顯色劑A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存

顯色劑B液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存

終止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存

20 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 30ml×1 瓶 2-8℃保存

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