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FN elisa檢測試劑盒操作步驟和注意事項
閱讀:980 發(fā)布時間:2019-1-4FN elisa檢測試劑盒操作步驟:
1,、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同),、標(biāo)準孔、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準品準確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。
2,、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3,、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此
重復(fù)5次,拍干,。
5,、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
6,、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色
10 分鐘.
7,、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
8,、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。
FN elisa檢測試劑盒注意事項:
1.嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃,。使用后立即冷藏保存試劑,。
2.洗板不正確可以導(dǎo)致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體,。溫育過程中不要讓微孔干燥掉,。
3.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值,。
4.底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5.避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果,。
6.在儲存和溫育時避免強光直接照射,。
7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8.任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體,。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性,。
9.不能使用過期產(chǎn)品。
10.如果可能傳播疾病,,所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。