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IL-4 elisa檢測試劑盒的實驗操作流程和實驗原理
閱讀:978 發(fā)布時間:2018-12-28實驗操作流程:
1. IL-4檢測試劑盒(多種屬)從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL,;空白孔不加。
4. 除空白孔外,,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板),。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,,37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,,在450nm波長處測定各孔的OD值,。
IL-4 elisa檢測試劑盒的
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。 往預先包被(IL-4)elisa檢測,白介素4捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,,經過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的(IL-4)elisa檢測,白介素4呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度,。