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 正常組織細(xì)胞敏感性可達(dá)156Pg/ml，操縱簡(jiǎn)樸 ，重復(fù)性良好,，可用于IL-8的基礎(chǔ)和臨床研究。在嚴(yán)峻感染病人的血清中,、炎癥局部滲出液中都可檢測(cè)到高水平的IL-8,。此外，近年來的研究表明,，IL-8可能與各種組織缺血后再灌注損傷的發(fā)生有關(guān),，包被緩沖液、PBS,、底物緩沖液配制同常規(guī)ELISA法,。封鎖液或抗體稀釋液應(yīng)新鮮配制或凍存，注意事項(xiàng)待檢標(biāo)本如為血清,，應(yīng)采用一次性容器,，血液采集后盡快(6小時(shí)以內(nèi))分離血清。原理采用兩株識(shí)別不同表位的抗IL-8單克隆抗體,，其中一株(4D7)作為包被抗體,，以識(shí)別和結(jié)合待檢標(biāo)本中的IL-8,，另一株作為酶標(biāo)抗體，與結(jié)合于包被抗體的IL-8的另一個(gè)表位結(jié)合并催化底物顯色,。試劑器材包括ELISA試劑盒提供包被抗體,、酶標(biāo)抗體、尺度品,，底物(ABTS),、96孔ELISA板。Il-8是一種分子量為8～10kD的多肽,，對(duì)嗜中性粒細(xì)胞,，T淋巴細(xì)胞、嗜鹼性粒細(xì)胞具有趨化作用,，并可激活嗜中性粒細(xì)胞,，是一種重要的炎癥介質(zhì)。

正常組織細(xì)胞操作步驟

1. 包被：pH9.5 碳酸鹽緩液稀釋4D7單克隆抗體粗提γ球蛋白至1μg/ml,，加入96孔板,，100μl/孔，放4℃,，36小時(shí),。

2. 封閉：0.1％吐溫PBS(Buffer A)沖洗96孔板三次，加3％BSA Buffer A(Buffer B)200μl/孔,，放37℃,，1小時(shí)。

3. 加待檢樣品：Buffer A 沖洗96孔板三次,，加待檢樣品及Buffer B 稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品100μl/孔,，放37℃，3小時(shí),。

4. 加酶標(biāo)抗體：Buffer A沖洗96孔板五次,，3％PEG Buffer A稀釋酶標(biāo)抗體至1∶800，加入96孔板,，100μl/孔,，放37℃，1小時(shí),。

5. 顯色：Buffer A沖洗96孔板五次,，pH5.4檸檬酸緩沖液溶解底物(ABTS)，0.2mg/ml,，加3％H2O2,，2μl/ml，加入96孔板,，100μ/孔,，室溫下或37℃顯色,。

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