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ELISA酶聯(lián)接免疫吸附劑測定實驗標準品溶解稀釋流程
閱讀:447 發(fā)布時間:2025-2-14ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定 ( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱,是一種檢測方法,,標準品是相對于具體的物質(zhì)有具體的標準品,。ELISA標準曲線是結(jié)果計算的尺子,標準品是ELISA 實驗成功與否的關(guān)鍵點,。ELISA 實驗標準品溶解稀釋流程:
1、粉末標準品短暫離心,,讓因運輸沾到管蓋,、管壁的標準品沉到管底。
2,、根據(jù)瓶標簽加入一定體積的蒸餾水,,加水后輕柔渦旋震蕩,室溫靜置溶解 10-30min,,讓粉末全溶解,。
注意:加水后暫不用移液槍吹吸,避免蛋白未溶解,,槍頭帶出部分蛋白,,待全溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。
3,、標準品梯度稀釋:
(1)標準品稀釋液的選擇:
若血清,、血漿、組織勻漿樣本,,用試劑盒中的標準品稀釋液,,梯度稀釋標準品。若細胞上清樣本,,建議用細胞培養(yǎng)基梯度稀釋標準品,。
(2)耗材準備:
準備8個1.5Ml離心管,,寫上S1-S7、空白,。
(3)梯度稀釋:
根據(jù)說明書,,每管加入等體積的標準品稀釋液(培養(yǎng)基)。吸取同體積溶解好的標準品到S1管中,,吹打10次混勻,,渦旋5S。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管,,吹打10次混勻,,渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度,。
(4)空白:
標準品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度,。注意:梯度稀釋標準品時,渦旋震蕩混勻后可短暫離心,,讓到蓋子,、壁上的液體到管底,再開始稀釋下個濃度,。