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       抗體是哺乳動物適應(yīng)性免疫系統(tǒng)對抗病原體的核心,，它是在病原體刺激下由漿細胞（效應(yīng)B細胞）所分泌的一種免疫球蛋白，能夠識別并結(jié)合特異的病原體抗原，隨后通過介導中和作用、調(diào)理作用,、效應(yīng)T細胞殺傷等來清除病原體

       特異性（specificity）的本質(zhì)含義是“Connected with one particular thing only"即只與唯yi的特定事物相關(guān)，具有專一性,。在免疫學上我們會說“抗體具有特異性",，指的就是抗體具有專一性,，某一特定的抗體只能與唯yi 一種抗原結(jié)合。其實準確來講是一類具有特定抗原表位的抗原,，因為某些不同的抗原具有相同的抗原表位（稱為交叉抗原）,，也可與同一種抗體特異性結(jié)合?？蒲泄ぷ麟x不開抗體,，WB、IP,、IHC,、IF,、ChIP和FC都需要用到抗體,，這幾種實驗方法中的抗體特異性選擇需要考慮的要點了解下，特異性的選擇主要需要考慮四個方面：蛋白特異性,、種屬特異性,、實驗方法特異性、標記物的特異性,。

 

1.蛋白特異性

針對需要檢測的蛋白查找抗體,，幾個細節(jié)要區(qū)分：

a.重組蛋白如果不是全長表達，則需要注意抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內(nèi),。

b.內(nèi)源性蛋白好能清楚其剪切與修飾的方式,，特殊表型的蛋白需要進行序列比對，并結(jié)合抗體免疫原序列,，查看交叉反應(yīng)的情況,。

c.磷酸化蛋白檢測需要確定具體位點，不同位點的磷酸化意味著可能有不同的機制存在,，不宜一概而論,。

 

2.種屬特異性

同種蛋白不同物種，有著或大或小的差異,。

a. 目前大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或設(shè)計多肽抗原的,，根據(jù)蛋白的同源性的情況與其他種屬發(fā)生交叉反應(yīng)。需要參照說明書注明的可反應(yīng)種屬信息,。

b. 一些稀有種屬很難找到抗體,，可以通過蛋白的序列比對，選擇同源序列免疫的抗體,，不過一般這種情況商不會受理其關(guān)于質(zhì)量的申訴,，如果可以申請到免費的抗體樣品，則利于抗體選擇,。

 

3.實驗方法特異性

目前使用抗體的實驗方法有很多,，不同的使用方法過程中,，因為對蛋白樣品的處理方式不一樣，蛋白的含量有差異,，對抗體的識別表位和效價要求都是不一樣的,。

 

4.標記物的特異性

一般基于實驗操作的實驗方法不會使用帶有標記的一抗，比如 WB,、IHC 等,，都是通過二抗類的試劑標記達到結(jié)果呈現(xiàn)的目的。但是基于儀器分析的一些實驗,，可能就會使用到直接標記的一抗,，比如流式實驗。那么需要了解到自己將要使用的儀器能檢測到的熒光范圍,，針對不通的參數(shù)要求選擇對應(yīng)的標記物,。在免疫熒光雙標實驗中，需要選配不同的熒光標記物,。